UGT1A1基因多態(tài)性與原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石關(guān)系的研究.pdf

1、目的：本研究通過對膽紅素代謝相關(guān)基因UGT1A1多態(tài)性(包括UGT1A1*28和UGT1A1*6)的分析,探討UGT1A1基因多態(tài)性與原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石（Primary Intrahepatic Stones PIS）形成的關(guān)系，為原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石的防治提供一定的理論依據(jù)。
　　對象與方法：
　　1.實驗對象
　　選擇2013年10月一2014年05月，青州市人民醫(yī)院收治的原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石患者為實驗組，共32例。其

2、中左肝內(nèi)膽管結(jié)石患者18例，右肝內(nèi)膽管結(jié)石患者10例，左右肝內(nèi)膽管結(jié)石患者4例；男性20例,女性12例；年齡在28-76歲，平均年齡52.68歲。
　　選擇15名健康查體者為對照組，男性10例，女性5例；年齡20-72歲，平均年齡46.72歲。所有對照組均經(jīng)彩超及腹部CT檢查未發(fā)現(xiàn)膽道結(jié)石。
　　抽取實驗對象空腹靜脈新鮮全血10毫升，分成三等份置于含抗凝劑的負壓抽血管中，充分混勻，一份送我院化驗室測定血清膽紅素水平，另兩份保

3、存于-70攝氏度冰柜。
　　2.實驗方法
　　使用DNA提取試劑盒，提取實驗對象靜脈血的DNA，應用RT-PCR方法，對UGT1A1基因的啟動子區(qū)（*28位點）和第一外顯子區(qū)（*6位點）的序列進行基因擴增并測序，分析得出樣本基因型。采用RT-PCR方法檢測血中B-UGTmRNA的表達。通過統(tǒng)計學方法分析UGT1A1*28及UGT1A1*6與原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石形成的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1、肝內(nèi)膽管結(jié)石組與對照組

4、UGT1A1*28與UGT1A1*6基因頻率分布：
　　1.1、肝內(nèi)膽管結(jié)石組UGT1A1*28基因頻率分布：野生型(*1/*1)為87.5％(n=28)，雜合突變型(*1/*28)為12.5%(n=4)，純合突變型(*28/*28)為0（n=0）。
　　肝內(nèi)膽管結(jié)石組UGT1A1*6基因頻率分布:野生型(G/G)為68.7%(n=22)，雜合突變型（G/A)為25%(n=8)，純合突變型（A/A）為6.3%（n=2）。

5、r>　　1.2、對照組 UGT1A1*28基因頻率分布：野生型(*1/*1)為60%(n=9)，雜合突變型(*1/*28)為40%(n=6)，純合突變型(*28/*28為0（n=0）。
　　對照組UGT1A1*6基因頻率分布：野生型(G/G)為100%(n=15)，未發(fā)現(xiàn)突變基因型。
　　2、肝內(nèi)膽管結(jié)石組與對照組兩組間UGT1A1*28與UGT1A1*6基因頻率分布比較：
　　UGT1A1*28基因分布兩組間無明顯差

6、異（χ2=3.115，P＞0.05）；UGT1A1*6基因頻率肝內(nèi)膽管結(jié)石組明顯高于對照組（χ2=4.234，P＜0.05）。
　　3、肝內(nèi)膽管結(jié)石組血B-UGTmRNA表達量為1.059±0.014，對照組血B-UGTmRNA表達量為2.635±0.106，肝內(nèi)膽管結(jié)石組血B-UGTmRNA表達量明顯低于對照組，P＜0.05。
　　結(jié)論：1.UGT1A1*28與原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石的形成無明顯關(guān)系。
　　2.UGT1A