三聚氰胺和生物信使分子硫化氫的熒光光譜檢測研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、硫化氫(hydrogen sulfide,H2S)是一種毒性很強的環(huán)境污染物,是重要的衛(wèi)生檢測項目。新近發(fā)現(xiàn)內源性 H2S是第三種生物信使分子,有關H2S的內源性生成、生物學效應、H2S供體和病理生理學意義等多方面的研究工作,都需要準確檢測生物信使分子H2S的含量,應用現(xiàn)有檢測方法存在不少困難,開展生物信使分子H2S新的檢測方法研究具有重要意義。
  三聚氰胺(Melamine;MM)是一種化工原料,在人體內可形成難溶性鹽而導致尿

2、路系統(tǒng)結石,嚴重危害人體健康。由于加入 MM可虛假提高乳制品的蛋白質含量,近年來,MM被非法用作食品添加物,引發(fā)了嚴重的乳制品污染突發(fā)事件。檢測食品中的MM已經成為人們高度關注的食品安全工作。
  本文第二章,基于內源性H2S對熒光素汞熒光強度的抑制作用,建立了生物信使分子硫化氫的高靈敏熒光猝滅光譜檢測新方法。在KH2PO4–K2HPO4緩沖溶液體系中,硫化氫與汞結合形成硫化汞,導致熒光素汞的熒光猝滅,在2.32×10-7~1.0

3、5×10-6mol·L-1濃度范圍內,體系的熒光猝滅強度(ΔF值)與硫化氫濃度之間具有良好的線性關系,線性回歸方程為ΔF=29.04 c+6.89(c,×10-7mol·L-1),相關系數r=0.9986。檢出限為6.97×10-8mol·L-1。測定細胞培養(yǎng)液樣品中生物信使分子硫化氫的加標回收率為91.47%~106.84%。方法靈敏,操作簡便,用于樣品中生物信使分子硫化氫的測定,結果滿意。
  2-(2-吡啶基)苯并咪唑(2-

4、PBI)是一種熒光配體,具有強熒光;Hg2+-2-PBI是一種非熒光配合物—熒光熄滅體。
  本文第三章用NaOH溶液吸收內源性H2S,轉化形成的S2-與Hg2+-2-PBI作用,生成HgS,釋放出2-PBI,待測體系產生熒光。測定體系的熒光強度,標準曲線法定量樣品中生物信使分子硫化氫的含量。建立了生物信使分子硫化氫的熒光分光光度檢測新方法。
  在優(yōu)化的實驗條件下,H2S的濃度為6.39×10-7~3.64×10-6mol

5、·L-1時,體系的ΔF值與H2S濃度之間的線性關系為ΔF=71.33c-3.6228(c,10-6mol·L-1),r=0.9991。檢出限為1.92×10-7mol·L-1。細胞培養(yǎng)液樣品測定的相對標準偏差為0.28%~0.94%,加標回收率為97.2%~103.1%。方法靈敏,操作簡便。用于生物信使分子H2S的測定,結果滿意。
  本文第四部分對B-R緩沖溶液-CPC表面活性劑介質中的甲酚紫高氯酸鹽進行了同步掃描研究,應用三維

6、熒光和吸收光譜分析了同步掃描光譜的共振熒光特性;基于三聚氰胺對甲酚紫高氯酸鹽的共振熒光強度的抑制作用,建立了阻抑共振熒光測定三聚氰胺的分析新方法。在9.6×10-8~2.8×10-6mol·L-1濃度范圍內,體系的ΔF值與三聚氰胺濃度之間具有良好的線性關系,線性回歸方程為ΔF=106.59c-5.44(c,10-6mol·L-1),相關系數r=0.9993。檢出限為2.87×10-8mol·L-1。奶粉樣品測定的相對標準偏差為1.9%~

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