冰凍切片聯(lián)合組織印片細(xì)胞DNA倍體分析在提高術(shù)中乳腺疾病診斷準(zhǔn)確率的研究.pdf

1、乳腺腫瘤是女性最常見的疾病之一，由于冷凍乳腺組織鏡下形態(tài)千變?nèi)f化，給術(shù)中診斷帶來了巨大的挑戰(zhàn)，因此如何提高術(shù)中病理診斷的準(zhǔn)確率對(duì)臨床治療具有重大的意義。本文將探討一種快速Feulgen染色方法并分析術(shù)中組織印片細(xì)胞DNA倍體在乳腺快速冰凍診斷中的價(jià)值，同時(shí)探討DNA倍體與Ki-67的表達(dá)及臨床病理特征的關(guān)系，為乳腺腫物的診斷、術(shù)中制定手術(shù)方案及評(píng)價(jià)預(yù)后提供一定的理論依據(jù)。
　　首先用成年雄性健康SD大鼠的肝臟組織標(biāo)準(zhǔn)印片進(jìn)行快速F

2、eulgen染色，通過設(shè)定不同的實(shí)驗(yàn)溫度和水解時(shí)間分析得出適合術(shù)中快速Feulgen染色的最佳染色時(shí)間及溫度，為術(shù)中DNA倍體分析提供準(zhǔn)確和標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)方法。我們收集2012年2月-2014年2月間北京市空軍總醫(yī)院病理科術(shù)中送檢乳腺標(biāo)本230例，230例乳腺標(biāo)本均進(jìn)行冰凍切片、組織印片快速Feulgen染色并進(jìn)行DNA倍體分析。將高年資病理醫(yī)師分成兩組：一組由2名醫(yī)師采用雙盲法對(duì)冰凍切片進(jìn)行術(shù)中診斷；另一組先由技師將組織印片進(jìn)行DNA掃描

3、，然后由另兩名醫(yī)師結(jié)合術(shù)中DNA倍體掃描結(jié)果對(duì)冰凍切片進(jìn)行雙盲閱片，做出聯(lián)合診斷，以上術(shù)中診斷結(jié)果均與術(shù)后石蠟切片診斷結(jié)果對(duì)比分析。術(shù)后檢測(cè)乳腺組織Ki-67的表達(dá)情況，同時(shí)收集臨床資料及術(shù)后組織病理資料。
　　我們觀察快速Feulgen染色中不同溫度下IOD值可以看出，在60℃和染色時(shí)間5min時(shí)，DNA含量（IOD值）最大，而且染色效果非常滿意，結(jié)構(gòu)清晰、細(xì)胞核染色深、背景著色淡。所以我們用以上染色條件作為本實(shí)驗(yàn)組的Feulg

4、en染色方法。術(shù)中送檢的101例良性乳腺標(biāo)本印片后99例經(jīng)快速Feulgen染色未掃描到>5C的異倍體細(xì)胞，掃描結(jié)果為陰性，2例掃描到>5C的異倍體細(xì)胞，結(jié)果為陽性；129例惡性乳腺標(biāo)本印片后114例經(jīng)快速Feulgen染色掃描到數(shù)量不等的>5C異倍體細(xì)胞，掃描結(jié)果為陽性，15例未掃描到>5C的異倍體細(xì)胞，結(jié)果為陰性；快速Feulgen染色法的DI均值和>5C細(xì)胞百分?jǐn)?shù)均值與常規(guī)Feulgen染色法無明顯差異（P>0.05）。230例術(shù)

5、中乳腺標(biāo)本冰凍切片單獨(dú)診斷準(zhǔn)確率為98.69％，延遲診斷率6.96%。術(shù)中冰凍切片結(jié)合DNA倍體分析聯(lián)合診斷準(zhǔn)確率為99.57%，延遲診斷率1.74%。冰凍切片與聯(lián)合診斷的準(zhǔn)確率無明顯差異（P>0.05），而延遲診斷率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。DNA倍體分析診斷的敏感性、陰性預(yù)測(cè)值不如冰凍切片診斷（P<0.05）；DNA倍體分析診斷的敏感性、陰性預(yù)測(cè)值不及冰凍切片聯(lián)合DNA倍體分析的診斷（P<0.05）；二者聯(lián)合診斷的各項(xiàng)診斷指標(biāo)均

6、比單純冰凍切片診斷高，但均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。組織學(xué)分組中只有纖維腺瘤和導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤的DI均值無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其它各組間>5C細(xì)胞百分?jǐn)?shù)均值和DI均值比較都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。隨著Ki-67分級(jí)的增加， DNA含量也增加，且DNA倍體含量的增加具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；根據(jù)術(shù)后組織病理資料分析，DNA含量與組織學(xué)分級(jí)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)（P<0.05），但DNA含量與患者腫物大小、年齡無關(guān)（P>0.05）。<

7、br>　　快速Feulgen染色方法快速，準(zhǔn)確，穩(wěn)定，易于自動(dòng)化操作，具有良好的染色效果，比常規(guī)Feulgen染色法大大縮短了染色時(shí)間，可應(yīng)用于術(shù)中冰凍AICM診斷DNA含量與倍體的測(cè)量和分析。對(duì)于大多數(shù)乳腺腫物，AICM-DNA和冰凍切片診斷一致，AICM-DNA可作為術(shù)中冰凍切片的一種良好輔助檢測(cè)方法。冰凍切片聯(lián)合組織印片細(xì)胞DNA倍體能提高術(shù)中乳腺冰凍診斷的準(zhǔn)確率，測(cè)定結(jié)果客觀，能提供有價(jià)值的診斷依據(jù)，應(yīng)用前景廣闊。DNA含量與乳