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文檔簡介
1、阿勒泰羊是一種脂臀型綿羊品種,主要通過尾部脂肪沉積與代謝消長規(guī)律適應(yīng)惡劣的環(huán)境以達到維持機體正常的新陳代謝和體溫,是研究綿羊尾脂沉積與代謝機制的理想模型。抵抗素(RETN)、小凹蛋白1(CAV1)、脂肪特異性磷脂酶 A2(PLA2G16)是脂肪細胞的關(guān)鍵調(diào)控因子,在細胞分化、增值等方面發(fā)揮了重要的作用。近年來研究發(fā)現(xiàn) RETN、CAV1、PLA2G16均參與脂肪的代謝、分化過程,為了進一步證實上述三個因子對綿羊的尾脂沉積與代謝性狀的影響
2、。本論文在模擬阿勒泰羊夏秋季節(jié)脂肪沉積、春冬季節(jié)水草匱乏時尾脂代謝方式基礎(chǔ)上,利用 PCR技術(shù)克隆了綿羊 RETN、CAV1、PLA2G16基因,并對其序列進行生物信息學(xué)分析;采用半定量 RT-PCR方法檢測了 RETN、CAV1、PLA2G16基因在綿羊主要組織中的表達;同時利用實時熒光定量 PCR技術(shù)檢測了持續(xù)饑餓與充足采食狀態(tài)下阿勒泰羊尾脂 RETN、CAV1、PLA2G16基因的差異表達情況。主要結(jié)果如下:
1.以阿勒
3、泰羊為研究對象,通過模擬其在夏秋季節(jié)脂肪沉積、春冬季節(jié)水草匱乏時尾脂的代謝方式,構(gòu)建了饑餓與非饑餓實驗?zāi)P汀?br> 2.以阿勒泰羊尾脂組織 cDNA為模板,通過 RT-PCR獲得 RETN、CAV1、PLA2G16基因完整CDS區(qū)序列。
3.半定量 RT-PCR檢測結(jié)果表明,RETN、CAV1、PLA2G16基因均在阿勒泰羊脂肪組織(腸脂和尾脂組織)中呈高豐度表達。提示 RETN、CAV1、PLA2G16基因在阿勒泰羊尾脂
4、生理過程中發(fā)揮重要作用。
4.應(yīng)用實時熒光定量 PCR技術(shù)檢測了持續(xù)饑餓狀態(tài)下阿勒泰羊尾脂組織 RETN、CAV1、PLA2G16基因的表達變化情況。結(jié)果表明,RETN基因在饑餓試驗前后阿勒泰羊尾脂組織中的表達量存在明顯差異,持續(xù)饑餓(饑餓狀態(tài))阿勒泰羊尾脂組織中 RETN的表達量極顯著高于正常采食狀態(tài)下尾脂組織的表達量;CAV1、PLA2G16基因則結(jié)果相反,正常采食(非饑餓狀態(tài))阿勒泰羊尾脂組織 CAV1、PLA2G16的
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