黃顙魚leptin基因克隆、組織表達(dá)及其與脂類代謝關(guān)系的研究.pdf

1、瘦素(leptin，LEP)，是一種主要由脂肪細(xì)胞分泌的激素類細(xì)胞因子，具有廣泛的生物學(xué)功能，其主要功能是脂類代謝的重要調(diào)控激素。本實(shí)驗(yàn)克隆和分析了黃顙魚leptin及其相關(guān)基因的結(jié)構(gòu)和表達(dá)，并初步闡明在黃顙魚卵巢發(fā)育過(guò)程中l(wèi)eptin對(duì)其脂肪動(dòng)員及卵巢發(fā)育的相關(guān)作用。
　　 1.黃顙魚leptin，leptin receptor(LEPR)及l(fā)eptin receptor overlapping transcript(LEPR

2、OT)基因cDNA全長(zhǎng)序列分別為1191 bp，4195 bp和827 bp，分別編碼172，1086和130個(gè)氨基酸(amino acid, aa)。同時(shí)，構(gòu)建leptin及其相關(guān)基因的進(jìn)化樹，并分析其蛋白結(jié)構(gòu)。
　　 通過(guò)熒光實(shí)時(shí)定量PCR，以β-肌動(dòng)蛋白為內(nèi)參照研究黃顙魚不同組織LEP，LEPR及LEPROT基因的表達(dá)水平。結(jié)果表明，黃顙魚leptin及其相關(guān)基因在所有被檢測(cè)組織中均有表達(dá)，LEP在肝臟組織中表達(dá)量最高;

3、LEPR及LEPROT基因在體內(nèi)組織分布類似，最高表達(dá)量組織是腦垂體。
　　 2.黃顙魚卵巢發(fā)育過(guò)程中相關(guān)指標(biāo)（包括形態(tài)學(xué)參數(shù)，粗脂肪含量，脂類代謝關(guān)鍵酶活性、mRNA豐度及l(fā)eptin與其受體基因的表達(dá)水平）的變化規(guī)律及相關(guān)關(guān)系的結(jié)果分析表明，黃顙魚卵巢發(fā)育過(guò)程中脂類代謝的途徑包括兩個(gè)時(shí)期:第一個(gè)時(shí)期是在各個(gè)脂肪存儲(chǔ)組織中通過(guò)肝臟脂肪的轉(zhuǎn)移、食物獲取或者脂肪生成進(jìn)行脂肪的累積，第二個(gè)時(shí)期是這些存儲(chǔ)組織中脂肪的消耗，通過(guò)抑制攝食

4、、脂肪分解和脂肪向卵巢的轉(zhuǎn)移進(jìn)而減少脂肪存儲(chǔ)組織的脂肪量。
　　 肝臟、腦和卵巢組織中l(wèi)eptin基因的mRNA水平在第Ⅲ期達(dá)到峰值，與此同時(shí)，黃顙魚體內(nèi)脂類代謝活躍，說(shuō)明leptin作為機(jī)體脂肪儲(chǔ)存信號(hào)傳達(dá)到腦組織，從而調(diào)控脂肪累積，保證卵巢發(fā)育過(guò)程中的能量需求。Leptin及其受體在各組織不同期的差異性，說(shuō)明其對(duì)卵巢的發(fā)育及脂肪動(dòng)員有重要影響作用，而腦組織中l(wèi)eptin及其受體基因的表達(dá)量在第Ⅴ期時(shí)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，表明此時(shí)le