阿勒泰大尾羊FTO基因表達的時空特異性及其與脂肪沉積的相關性研究.pdf

1、新疆肉用綿羊多為脂臀型品種，雖肉用性能良好，但尾脂過大，有些品種的尾脂甚至占體重的17％以上。如何降低尾脂而又不影響肌內脂肪含量，一直是困擾新疆綿羊優(yōu)良肉質性狀，種質資源利用的關鍵問題，而解決的關鍵是深入了解綿羊體內各部位脂肪沉積規(guī)律的差異及相關調節(jié)因子表達變化，探索這些差異形成的機理。脂肪和肥胖相關基因(Fat mass and obesity associated gene，F(xiàn)TO)是第一個與普通肥胖相關的基因，與脂肪沉積和代謝相關

2、激素及基因的表達有關，且在肌肉和脂肪的表達差異顯著。目前，綿羊FTO基因表達的時空特異性及與脂肪沉積相關性研究鮮為報道。本試驗以雄性阿勒泰大尾羊為研究對象，研究其不同部位FTO基因表達和脂肪沉積發(fā)育性規(guī)律的差異及相關性，同時測定與脂肪代謝相關激素和基因表達的水平;探索FTO基因和主要調節(jié)因子與脂肪沉積的關系。
　　1.不同部位脂肪細胞形態(tài)的研究
　　為了研究阿勒泰大尾羊不同部位脂肪組織沉積的變化規(guī)律，分別采集了90日齡時腎周

3、脂和尾脂組織樣品及270日齡時腎周脂、尾脂、皮下脂組織樣品，采用改進的冰凍脂肪組織切片油紅O滴染技術，運用Motic顯微數(shù)字圖像處理系統(tǒng)，測定脂肪組織面積。本試驗研究結果顯示:90日齡阿勒泰羊尾脂脂肪細胞面積極顯著高于同日齡阿勒泰大尾羊腎周脂脂肪細胞面積(P＜0.01)，270日齡時尾脂和皮下脂肪細胞面積都極顯著高于腎周脂(P＜0.01)，但脂肪細胞的面積在尾脂和皮下脂肪之間無顯著差異。從90日齡至270日齡時，腎周脂細胞面積呈增加的趨

4、勢，而尾脂細胞的面積呈減少的趨勢。
　　2.脂代謝相關酶和激素的測定
　　為研究90日齡和270日齡阿勒泰大尾羊血脂指標和脂肪沉積的關系，采用放射性免疫和酶聯(lián)免疫法，測定了血清中7種酶和9種激素生理生化指標。本試驗研究結果:阿勒泰大尾羊90日齡瘦素極顯著高于270日齡(P＜0.01);阿勒泰大尾羊90日齡谷草轉氨酶、谷酰轉氨酶的濃度極顯著地低于270日齡(P＜0.01);阿勒泰大尾羊90日齡激素敏感酯酶的濃度顯著地高于270

5、日齡(P＜0.05)。
　　3.FTO基因表達與脂肪沉積的關系
　　為了研究阿勒泰大尾羊FTO基因表達的時空特異性及其與脂肪沉積的相關性。采用熒光定量 PCR與蛋白免疫印跡方法，測定了各組織與不同部位脂肪組織中FTO mRNA和蛋白表達水平。結果顯示:FTO基因在下丘腦、海馬、心肌背最長肌、心肌、腎臟、肝臟、海馬和垂體中都有表達。90日齡阿勒泰大尾羊下丘腦中FTO mRNA表達水平極顯著高于各部位脂肪組織。90日齡阿勒泰大尾

6、羊FTO mRNA在海馬中表達水平最高，其次是垂體，并且極顯著高于背最長肌、心肌、腎臟、肝臟等組織的表達水平(P＜0.01)。270日齡時與90日齡時FTO基因在各器官中的表達豐度趨勢基本一致，但在腎臟和肝臟中FTO mRNA表達水平極顯著低于背最長肌(P＜0.01)，海馬和垂體中的表達水平極顯著高于背最長?。≒＜0.01）。90日齡阿勒泰大尾羊尾脂F(xiàn)TO mRNA表達水平與腎周脂、心周脂的無顯著差異。然而在270日齡，尾脂中FTO m

7、RNA的表達水平顯著高于腎周脂、心周脂和皮下脂肪(P＜0.05)。270日齡脂肪組織中FTO蛋白的表達檢測顯示，尾脂同樣顯著高于腎周脂和皮下脂肪的(P＜0.05)。
　　4.FTO蛋白在各脂肪細胞中的定位
　　為進一步確定FTO蛋白在脂肪細胞中的定位，對阿勒泰大尾羊不同部位脂肪組織脂肪細胞應用免疫熒光組織化學技術以及激光共聚焦顯微鏡技術觀察FTO蛋白的定位。結果顯示:FTO蛋白在腎周脂和尾脂脂肪細胞膜內側邊緣及胞質中出現(xiàn)。<

8、br>　　結論:
　　1.阿勒泰大尾羊不同部位的脂肪細胞面積存在時空差異性，尾脂的脂肪細胞面積高于其他部位的脂肪組織，270日齡較90日齡尾脂脂肪細胞面積有減少的趨勢，而其他部位脂肪組織隨著日齡的增長，細胞面積也逐漸增加。
　　2.不同日齡的阿勒泰大尾羊血清中瘦素、谷草轉氨酶、谷酰轉氨酶、激素敏感酯酶濃度存在差異性。
　　3.FTO mRNA和蛋白在阿勒泰大尾羊不同日齡的各組織存在時空特異性，在270日齡時尾脂中FTO