PRKCZ和UTS2基因多態(tài)性與2型糖尿病易感性的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、2型糖尿病(T2DM)是嚴(yán)重危害人類健康的慢性非傳染性疾病，世界范圍內(nèi)T2DM的發(fā)病率不斷上升，全球T2DM人口已經(jīng)從1994年的1億增加到2000年的1.5億，預(yù)計(jì)2010年將達(dá)到2.15億，2025年達(dá)到3億。目前認(rèn)為，T2DM的發(fā)病機(jī)制中，最主要的是胰島β細(xì)胞膜上的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路障礙造成的胰島素抵抗，其發(fā)生發(fā)展是遺傳與環(huán)境綜合作用的結(jié)果。 遺傳因素被認(rèn)為是T2DM主要的危險(xiǎn)因素之一。研究表明，T2DM患者親屬的患病率是非患者

2、親屬的4-8倍，雙生子研究也發(fā)現(xiàn)T2DM具有很強(qiáng)的遺傳傾向。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)基因多態(tài)尤其是單核苷酸多態(tài)性(Single NucleotidePolymorphisms，SNPs)造成編碼的蛋白質(zhì)的改變可能是疾病發(fā)生的內(nèi)在因素。在中國(guó)北方漢族人群中進(jìn)行的全基因組掃描和精細(xì)定位結(jié)果顯示，該人群T2DM易感基因定位于1p36.33-36.23區(qū)域。位于該區(qū)域的蛋白激酶Cζ亞型(PRKCZ)在介導(dǎo)胰島素耐受的T2DM發(fā)生中發(fā)揮

3、著重要的作用，尾加壓素Ⅱ(UTS2)基因及其受體結(jié)合物可能影響胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，其基因多態(tài)性和T2DM的發(fā)生發(fā)展存在聯(lián)系。我們采用病例.對(duì)照研究方法，應(yīng)用PCR-RFLP為基礎(chǔ)的檢測(cè)技術(shù)，研究PRKCZ和UTS2基因的多態(tài)性與。T2DM易感性的關(guān)系，探討其單獨(dú)或聯(lián)合與T2DM發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，以期尋找T2DM發(fā)病可能的遺傳病因，為T2DM的一級(jí)預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。 第一部分蛋白激酶Cζ亞型(PRKCZ)基因的標(biāo)簽SNP多態(tài)性與2型

4、糖尿病易感性的關(guān)系有研究表明定位于lp36，33-36.23區(qū)域，并位于胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上的蛋白激酶Cζ亞型(PRKCZ)基因?yàn)門2DM的易感基因。位于一條染色體上或某一區(qū)域的一組相關(guān)聯(lián)的SNP等位位點(diǎn)被稱作單體型(haplotype)，它們代表了一個(gè)群體中人與人之間的大部分多態(tài)性。一個(gè)染色體區(qū)域可以有很多SNP位點(diǎn)，但是只用少數(shù)幾個(gè)標(biāo)簽SNPs(tag SNPs)，就能夠提供該區(qū)域內(nèi)大多數(shù)的遺傳多態(tài)模式，這樣將大大減少用于基因型與疾

5、病關(guān)聯(lián)分析中的SNPs。本研究采用病例一對(duì)照研究設(shè)計(jì)，對(duì)391例T2DM患者和429例健康對(duì)照，應(yīng)用PCR-RFLP技術(shù)，檢測(cè)并分析PRKCZ基因6個(gè)標(biāo)簽SNPs位點(diǎn)多態(tài)性，其組成的單倍型在中國(guó)東南方漢族人群中的分布及其與T2DM的發(fā)病關(guān)聯(lián)。應(yīng)用logistic回歸模型計(jì)算不同基因型人群患T2DM的風(fēng)險(xiǎn)(OR)及其95％可信區(qū)間(95％CI)。 第二部分 PRKCZ基因的兩個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)與2型糖尿病家系人群易感性的關(guān)系T2DM是一

6、種具有高度異質(zhì)性的復(fù)雜多基因遺傳病，其遺傳模式尚不清楚。有報(bào)道通過定位克隆法，利用病例一對(duì)照研究發(fā)現(xiàn)PRKCZ基因內(nèi)的一個(gè)SNP位點(diǎn)rs436045與該疾病相關(guān)。同時(shí)，我們?cè)贜CBI數(shù)據(jù)庫(kù)中按基因名稱方式查尋PRKCZ基因中的SNP，并在陽性位點(diǎn)rs436045附近選擇了基因變異頻率較高的多態(tài)性位點(diǎn)rs381664，采用家系內(nèi)、外病例一對(duì)照多種設(shè)計(jì)類型，分析該基因上述兩個(gè)位點(diǎn)多態(tài)性，探討其與T2DM易感性的關(guān)系。 第三部分PRK

7、CZ與UTS2基因的聯(lián)合作用與2型糖尿病易感性的關(guān)系PRKCZ與UTS2基因均定位于1p36.33.p36.2區(qū)域，且位于胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路上，對(duì)于刺激葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)以及胰島β細(xì)胞分泌胰島素等有一定的調(diào)節(jié)作用。本研究在中國(guó)東南方漢族人群中選取了上述兩個(gè)基因的標(biāo)簽SNPs位點(diǎn)，應(yīng)用多因子降維法(MDR)分析8個(gè)標(biāo)簽位點(diǎn)的交互作用，構(gòu)建最佳組合的交互作用模型。同時(shí)選取兩基因標(biāo)簽SNPs位點(diǎn)中經(jīng)兩種方法檢驗(yàn)(logistic回歸和FDR校正)與