豬鏈球菌2型在感染豬體內(nèi)的組織定位和動態(tài)分布.pdf

1、豬鏈球菌2型是重要的人畜共患病的病原，除感染豬、馬、貓等動物之外，還可感染人，引起腦膜炎，并可能導(dǎo)致永久性耳聾或復(fù)視等后遺癥、心內(nèi)膜炎、敗血癥及突發(fā)性死亡。SS2感染已成為影響全世界養(yǎng)豬業(yè)的重要問題之一。對SS2的致病機制的研究尚不明確，尤其是SS2在動物各組織內(nèi)的抗原定位和動態(tài)分布更不十分清楚。本研究采用特異性免疫熒光染色的方法對SS2在豬組織內(nèi)的抗原定位和動態(tài)分布進行了研究，為進一步探討感染機制和致病機理提供了依據(jù)。本研究主要內(nèi)容如

2、下： ⑴建立特異性免疫熒光染色方法檢測豬組織內(nèi)SS2病原。直接從組織中檢測SS2抗原，具有特異、敏感、快捷的特點。 ⑵豬鏈球菌2型在小型豬體內(nèi)的組織定位。采用30頭SPF巴馬小型豬，隨機分為10組，每組3頭，其中兩頭用作感染，一頭作為對照。用致病性豬鏈球菌2型的四川分離株ZY05719感染SPF巴馬小型豬，分別于攻毒后的12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、10d時處死，剖殺并采集樣品（扁桃體、淋巴結(jié)、

3、肝臟、脾臟、肺臟、腎、腦），制作冰凍切片，并用特異性免疫熒光抗體進行染色，觀察十日內(nèi)細菌在各組織內(nèi)的定位情況。實驗表明，SS2主要定殖于扁桃體的隱窩附近；在脾的邊緣區(qū)和動脈周圍淋巴鞘附近、淋巴結(jié)的生發(fā)中心和皮質(zhì)內(nèi)、肝血竇、肺間質(zhì)和腎小體中均可見菌體狀熒光顆粒；在腦組織中發(fā)生腦膜炎的區(qū)域，如皮層等可檢出細菌。 ⑶豬鏈球菌2型在小型豬體內(nèi)的動態(tài)分布。采用30頭SPF巴馬小型豬，隨機分為10組，每組3頭，其中兩頭作為感染組，一頭作為空

4、白。用致病性豬鏈球菌2型感染SPF巴馬小型豬，分別于攻毒后的12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、10d時處死，用采集的樣品制成冰凍切片（扁桃體、淋巴結(jié)、肝臟、脾臟、肺臟、腎、腦），用特異性免疫熒光抗體染色法和細菌分離方法，觀察細菌在各組織內(nèi)的動態(tài)變化。結(jié)果表明，細菌在肝、腎、肺和脾等實質(zhì)器官內(nèi)呈現(xiàn)相似的動力學(xué)，感染后的前3天持續(xù)上升，第6天開始下降；在扁桃體內(nèi)12小時就能檢出SS2，并持續(xù)存在細菌；SS2在腦組織中呈