豬鏈球菌2型的分離鑒定以及實(shí)驗(yàn)性感染豬鏈球菌2型的病理學(xué)研究.pdf

1、豬鏈球菌(Streptococcus suis,SS)是一種能引起人、豬和其他動(dòng)物感染、發(fā)病的重要致病菌。根據(jù)其莢膜多糖(CPS)，將SS分為35個(gè)血清型，即1/2型和1～34型，其中豬鏈球菌2型是毒力最強(qiáng)、流行最廣泛的血清型。2型豬鏈球菌可以引起豬發(fā)病，產(chǎn)生腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎、肺炎和敗血癥等癥狀，其中以腦膜炎癥狀最為顯著。我國(guó)于1998年、2005年分別在江蘇省和四川省部分地區(qū)的豬群中暴發(fā)該病，并引起了人的感染和死亡。該病不僅給

2、養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，而且給公共衛(wèi)生和食品安全造成嚴(yán)重威脅，已經(jīng)成為全球性的人畜共患病，并引起很多國(guó)家的高度重視。我國(guó)對(duì)該病的研究熱點(diǎn)主要集中在流行病學(xué)調(diào)查、病原性分析、疫苗和快速診斷技術(shù)研究，對(duì)豬鏈球菌2型的病理學(xué)缺乏系統(tǒng)研究。本文從華東某地區(qū)某豬場(chǎng)發(fā)生豬鏈球菌病樣品中分離出一株豬鏈球菌，并進(jìn)行了病原學(xué)研究，同時(shí)還運(yùn)用豬鏈球菌2型四川分離株SSsc0501對(duì)仔豬進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性感染，開(kāi)展系統(tǒng)的病理學(xué)研究。 (一)豬鏈球菌2型的分

3、離、鑒定及其莢膜多糖2J基因的克隆與序列分析 2006年，華東地區(qū)某豬場(chǎng)飼養(yǎng)的豬急性發(fā)病，我們從病死豬的病料中成功分離到一株豬鏈球菌，經(jīng)革蘭氏染色、血清凝集試驗(yàn)和PCR鑒定，確診為豬鏈球菌2型。通過(guò)對(duì)毒力因子的鑒定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)MRP和EF均為陽(yáng)性。將豬鏈球菌2型分離株用針對(duì)其CPS2J序列的特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增，得到與預(yù)期大小相符的DNA片段，將PCR產(chǎn)物回收、連接、轉(zhuǎn)化后測(cè)序，得到了676bp的核酸序列，同源性分析表明，SS2-H

4、D01株CPS2J序列與已公布的國(guó)內(nèi)外豬鏈球菌2型菌株核苷酸同源性在92.8％～99.9％之間，具有較高的同源性；與豬鏈球菌1型的同源性只有46.3％。 (二)實(shí)驗(yàn)性感染豬鏈球菌2型的病理學(xué)研究 選用40日齡體征健康的斷奶仔豬10頭，用2005年豬鏈球菌2型四川分離株SSsc0501通過(guò)肌肉注射進(jìn)行人工感染，研究豬鏈球菌2型引起的仔豬各組織器官的病理學(xué)特征。結(jié)果表明，仔豬在人工感染22小時(shí)后出現(xiàn)臨床癥狀，此后48小時(shí)內(nèi)全

5、部死亡，說(shuō)明該2型豬鏈球菌對(duì)體征健康的仔豬致病性很強(qiáng)。該2型鏈球菌主要引起仔豬多器官出血性敗血癥。肝臟出血，肝索排列不齊，竇狀隙內(nèi)充滿紅細(xì)胞，中央靜脈內(nèi)有炎性細(xì)胞滲出，且中央靜脈發(fā)生淤血。肝細(xì)胞發(fā)生腫脹，可見(jiàn)顆粒變性、水泡變性和脂肪變性：心臟無(wú)明顯病變；脾臟出血，尤其是中央動(dòng)脈周圍出血嚴(yán)重，淋巴細(xì)胞減少，部分淋巴細(xì)胞壞死；肺臟可見(jiàn)間質(zhì)性肺炎，肺泡的間隔增寬，出血，有大量炎性滲出，部分間質(zhì)出現(xiàn)壞死灶，其中還發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌，部分間質(zhì)部血管出現(xiàn)透