臍帶血巨核系祖細胞注射液有效性臨床試驗研究.pdf

1、一、研究背景
　　近年來,我國血源短缺的問題日益嚴重,當前我國獻血量僅為0.84％,遠遠低于世界高收入國家的4.54%和中等收入國家的1.01%,并且臨床用血需求以每年10-15%的速度快速增長,而采血量的增幅,以北京、天津為例,僅為2.9%和6.5%。血液供與求之間巨大的差距,造成我國多個城市用血極度緊張,從而大大影響急重癥患者的臨床治療。在軍事醫(yī)學方面,血液保障也占有舉足輕重的作用?，F(xiàn)代戰(zhàn)爭是在核武器威脅下的以高技術兵器為主的

2、戰(zhàn)爭,核武器、化學或者生物武器損傷成為戰(zhàn)斗減員的重要因素之一。其中核化生武器所造成的骨髓損傷抑制及其并發(fā)的血小板減少和貧血危害巨大。因此,亟待尋找一種合適有效的“人工血液”替代一部分臨床用血,不僅可以緩解臨床輸血的壓力,而且對戰(zhàn)時血液保障提供了技術支持與儲備,具有重要的社會價值與戰(zhàn)略意義。
　　眾所周知,造血干細胞具有自我更新與多向分化潛能的優(yōu)勢,已成功地應用于惡性腫瘤、各種血液性疾病等的支持治療和免疫治療。我室前期的研究結果表明

3、,臍帶血含有豐富的造血干/祖細胞,其增殖能力強,分裂期細胞多,在適宜的擴增時間及合理的細胞因子組合下,可以在擴增造血細胞的同時定向誘導其分化,產生大量功能細胞,如巨核系祖細胞、紅系祖細胞、粒系細胞等,以及分化終末期的血小板、紅細胞、樹突狀細胞、NK細胞等。根據(jù)上述研究基礎,我室研發(fā)出兩種新的臍帶血造血細胞產品---“臍帶血紅系祖細胞注射液”和“臍帶血巨核系祖細胞注射液”,均獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)臨床試驗批文。如果通過這兩

4、種細胞產品的臨床試驗,證實其安全性及有效性,并獲得臨床使用許可,這將是輸血治療以及造血支持治療中的一次重要的技術突破。
　　那么選擇什么樣的疾病作為臨床試驗的適應癥來證實我們研發(fā)的細胞產品的生物安全性與治療有效性呢?惡性腫瘤是嚴重威脅人們生命健康的一類重大疾病。放化療是惡性腫瘤的主要治療方法,然而卻可導致嚴重的造血損傷,從而引起紅細胞、白細胞、血小板的產生減少、破壞加重,表現(xiàn)為貧血、出血、感染等,嚴重者可致死亡。特別是惡性血液病患

5、者,不僅普通的放化療可以導致造血損傷,而且造血干細胞移植(HSCT)的預處理治療、移植物抗宿主病(GVHD)將進一步加重造血損傷。目前臨床上已用重組的紅細胞生成素(EPO)、粒/單細胞集落刺激因子(G-CSF/GM-CSF)來改善由于化療引發(fā)的貧血和粒細胞減少,然而目前還沒有一種能夠有效改善放化療后血細胞減少的藥物。另一種最常用的治療方式是輸注血小板與紅細胞,這種治療方式對于防止患者自發(fā)性出血以及改善患者貧血癥狀,保證抗癌藥物、化療藥物

6、按規(guī)定的療程用完起到重要的輔助治療作用。據(jù)統(tǒng)計,美國每年為緩解化療后引起的血細胞減少消耗的血液量約200萬單位,中國每年用血量超過1500萬單位。然而,血液供應的缺口嚴重影響這些患者的治療。此外,反復輸注血小板面臨血小板輸注無效,反復輸注紅細胞可致含鐵血黃素沉著,引起繼發(fā)性血色病,導致肝硬化、心力衰竭、糖尿病、性腺功能障礙等一系列輸血并發(fā)癥,同時也不可避免地增加了血源性感染及輸血反應發(fā)生的概率。
　　面對上述惡性腫瘤放化療后血細胞

7、減少癥的治療現(xiàn)狀,我們根據(jù)臍帶血來源的血細胞產品制備周期、保存時效等特點,通過與多家臨床單位的反復咨詢溝通,選擇了這種定期或擇機擇時進行輸血治療的內科系統(tǒng)疾病例如惡性腫瘤放化療后的造血損傷作為我們細胞產品適合應用的疾病類型,并以惡性腫瘤尤其是惡性血液病放化療后的造血損傷為適應癥開展臨床試驗研究,如果能解決這部分患者血液來源以及治療效果的問題,那么將具有重要的社會價值與經濟效益。
　　二、研究目的
　　本研究針對前期已獲SFD

8、A臨床試驗批文的“巨核系祖細胞注射液”,選擇可以定期或擇機擇時進行輸血治療的惡性腫瘤尤其是惡性血液病放化療后造血損傷為適應癥,并依據(jù)適應癥的特點對細胞產品的制備技術與質控標準等進行相應修改、補充、調整及完善,隨后開展臨床試驗研究,證實細胞產品的生物安全性及治療有效性,繼而獲得國家相關主管部門的臨床使用許可,為臨床成分輸血和戰(zhàn)時血液保障提供新的血細胞來源。同時,由于這兩項臍帶血造血細胞產品是嚴格遵守《中華人民共和國藥品管理法》及參考國際相

9、關標準研發(fā)的新型治療性干/祖細胞產品,在臨床試驗過程中將嚴格按照臨床試驗批件、國家衛(wèi)生部《醫(yī)療技術臨床應用管理辦法》以及參照國際干細胞研究學會《干細胞臨床轉化指南》等相關標準進行研究,為干細胞從基礎研究到臨床應用的轉化探索出一條規(guī)范之路。
　　三、主要研究內容與方法
　　1.根據(jù)“臍帶血巨核系祖細胞注射液”Ⅰ期安全性臨床試驗研究結果,修改并完善細胞產品的標準化制備操作規(guī)程、質量控制操作規(guī)程、運輸與保存操作規(guī)程、臨床輸注標準化

10、操作規(guī)程。
　　2.建立并制定“臍帶血巨核系祖細胞注射液”有效性臨床試驗研究方案,建立并制定標準化臨床有效性指標檢測操作規(guī)程。
　　3.整理“臍帶血巨核系祖細胞注射液治療腫瘤放化療后血小板減少臨床試驗研究”相關材料,申報總后勤部衛(wèi)生部臨床新技術批文,并開展有效性臨床試驗研究。
　　4.建立并制定“臍帶血巨核系祖細胞注射液”的有效性臨床試驗標準化研究方案,確保臨床試驗數(shù)據(jù)的標準、真實、可控及科學。
　　5.完成臨床

11、試驗研究的細胞產品的制備、質控及指標檢測,并收集、整理、分析臨床有效性試驗數(shù)據(jù)。
　　四、實驗結果
　　1.通過整理與分析臍帶血巨核系祖細胞Ⅰ期臨床試驗的細胞產品的制備、質控數(shù)據(jù)及臨床生物安全性試驗數(shù)據(jù),修改與完善了細胞產品的標準化制備操作規(guī)程、質量控制操作規(guī)程、運輸與保存操作規(guī)程、臨床輸注標準化操作規(guī)程、原始試驗記錄(樣表)等文件。
　　2.整理申報總后勤部衛(wèi)生部臨床新技術“臍帶血巨核系祖細胞注射液治療腫瘤放化療后血

12、小板減少臨床試驗研究”有關細胞制備與質量控制部分的材料,并于2011年5月獲得批文。
　　3.從2011年10月至2013年04月,共制備“臍帶血巨核系祖細胞注射液”45例。經檢定,細胞狀態(tài)良好,細胞擴增率達5-10倍,細胞存活率均為90%以上,巨核系祖細胞特異性表面標志CD41的表達率為40-60%,細菌及真菌檢測、支原體檢測、內毒素檢測等均為陰性,45例細胞產品全部符合質量控制標準。
　　4.從2011年10月至2013