超選擇性冠狀動脈內臍帶血單個核細胞移植治療冠心病的初步研究.pdf

1、背景：冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（CAD)指冠狀動脈粥樣硬化使血管腔狹窄或阻塞，或因冠狀動脈功能性改變（痙攣）導致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病，統稱冠狀動脈性心臟?。–HD），簡稱冠心病，亦稱缺血性心臟?。↖schemic heart disease)。缺血性心肌病(ICM)是心肌供血長期不足，致散在性心肌纖維化或心肌梗死后心肌缺血區(qū)域由纖維瘢痕所替代，臨床表現以心力衰竭（heart failure)和(或)心律失常(cardiac

2、arrhythmia)為主。目前 ICM治療方法有藥物治療，冠脈搭橋術(CABG)或和皮腔內介入成形術（PTCA)。但部分患者因冠脈病變嚴重無CABG或PTCA指針，且藥物治療效果差。近年來崛起的多種干細胞移植療法為這一部分患者的治療提供了嶄新的方法和希望，也成為各國學者研究的熱點。大量基礎實驗研究表明，干細胞能夠改善受損心肌的灌注和收縮功能。本文即通過應用臍帶血干細胞移植治療冠心病進行臨床研究。
　　目的:探討超選擇性冠狀動脈內

3、人臍帶血單個核細胞移植治療冠心病的可行性，安全性及有效性，探討其機制。
　　方法:
　　1.臍帶血單個核細胞的分離及提?。核心殠а鶃碜再F州省人民醫(yī)院婦產科，采自無妊娠并發(fā)癥，身體健康，新生兒足月分娩（37-40周）孕婦。捐獻者自愿捐獻，且同意用于科學研究和臨床治療。一次性血袋采集臍血80－120 mL，6 h內分離，采用60 g/L羥乙基淀粉沉淀及1.077 g/L ficoll-paque密度梯度離心兩步分離法，吸取中

4、間含單個核細胞的白膜層，PBS洗2次。移植前將細胞置于含10μmol/L BrdU、體積分數為0.1胎牛血清的L-DMEM培養(yǎng)基中，在37℃、體積分數為0.05的CO2飽和濕度細胞培養(yǎng)箱孵育24 h。
　　2.選擇經冠脈造影明確診斷為多支彌漫病變的冠心病患者10例，常規(guī)消毒鋪，2％利多卡因局部麻醉，橈動脈穿刺建鞘，通過指引導管經鋼絲ATM（日本醫(yī)療器械公司泰爾茂Terumo Corp）將非快速交換球囊(over-the-wier)

5、（強生 cordis公司）超選擇到靶血管，退出鋼絲，4-6atm充盈球囊，經球囊中央孔將5mL臍帶血單個核細胞緩慢灌注3分鐘至靶血管。全程監(jiān)測心電、血壓，于術前、術后1周，術后3月抽取外周靜脈血檢測肝腎功、肌鈣蛋白T（TnT）、NO、VEGF、BNP，細胞免疫學檢查等變化，術前及術后1周,術后3月行動態(tài)心電圖、超聲心動圖，6分鐘步行實驗等檢查，并記錄患者其它不良反應及心血管事件發(fā)生情況。
　　結果:
　　1.所有患者均成功完

6、成手術，手術時間平均為(12±2.58）分，放射照射時間（8±3.14）分，術中及術后患者心率血壓均在正常范圍內。
　　2.心功能檢測
　　2.1術前及術后1周患者心功能無明顯變化，術前，術后1周與術后3月相比較：心功能II，III級患者分別為2例，8例，術后3月II，III級分別為7例，3例，表明術后患者心功能改善。
　　2.2臍帶血單個核細胞移植術后3月，LVEF，6-MWT(m)顯著增加，LVDd(mm)顯著減小

7、。術前，術后1周，術后3月LA無明顯變化。
　　2.3臍帶血單個核細胞移植術后1周，外周靜脈血NO及VEGF顯著升高，術后3月，BNP顯著降低，NO及VEGF進一步顯著升高。
　　2.4臍帶血單個核細胞移植后1周，心律失常評分顯著降低，術后3月心律失常評分進一步顯著降低。
　　3.術前，術后1周，術后3月肝腎功能，主要檢測指標為（AST，ALT，CREA，BUN）,TnT等無明顯變化，差異無統計學意義。
　　4.

8、術前，術后1周，術后3月細胞免疫學檢查：主要指標為CD3(T)%,CD4(Th)%,CD8(Ts)%,CD4/CD8,(T+B+NK)，差異無統計學意義。
　　5.移植術中，術后1周，術后3月患者未出現發(fā)熱，全身不適，精神萎靡，食欲減退，惡心嘔吐，皮疹，頭痛等臨床癥狀，未出現惡性心律失常及急性心力衰竭發(fā)生，未出現死亡病例。
　　結論：超選擇性冠狀動脈內臍帶血單個核細胞移植治療冠心病是一種安全可行的方法，可能通過促進機體NO，