脂肝方對(duì)非酒精性脂肪肝大鼠肝細(xì)胞自噬的影響.pdf

1、目的:探討脂肝方對(duì)非酒精性脂肪性肝病細(xì)胞自噬行為的調(diào)節(jié)作用機(jī)制。
　　 方法:健康SPF級(jí)SD大鼠32只，所有大鼠均自由進(jìn)水進(jìn)食，隨機(jī)分成4組:適用性喂養(yǎng)1W后，隨機(jī)分出8只作為正常對(duì)照組（第8周末隨機(jī)處死8只）;模型組、中藥組和西藥對(duì)照組各8只，喂飼高脂飼料（2％膽固醇+10％豬油+88％標(biāo)準(zhǔn)飼料）。中藥組大鼠給予脂肝方灌胃，西藥組大鼠給予立普妥灌胃。各組動(dòng)物喂養(yǎng)至12周末處死取材。測(cè)定血清血脂TC、TG、HDL-c、LDL-

2、c;肝功能AST、ALT。常規(guī)制備肝臟染色，分析肝臟炎癥程度及脂肪性改變程度;光鏡觀察肝臟病理學(xué)變化，電鏡下觀察肝細(xì)胞線粒體、自噬小體。檢測(cè)NF-κB/P65、TNF-α蛋白，觀察肝細(xì)胞自噬體發(fā)生的情況，所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析。
　　 結(jié)果:與模型組TG、TC、HDL-c、LDL-c比較，中藥組、西藥組均有顯著性差異（P＜0.05）;中藥組與西藥組比較無(wú)顯著性差異(P＜0.05)。中藥組的ALT和AST較模型

3、組顯著下降(P＜0.05)。西藥組的AL、和AST較中藥組增高（P＜0.05）。HE染色電鏡下可見模型組大鼠肝細(xì)胞增大，胞漿內(nèi)脂滴大小不一，呈中至重度肝細(xì)胞脂肪變性，細(xì)胞水腫嚴(yán)重。中藥組、西藥組大鼠肝組織脂肪變程度較模型組有不同程度減輕，但差異無(wú)顯著性意義（P＞0.05）。正常組、中藥組和西藥組炎癥活動(dòng)計(jì)分顯著低于模型組（P＜0.05）。電鏡透射結(jié)果顯示，正常組未見自噬體，模型組與西藥組可見少量自噬體，中藥組的自噬體與其他組相比明顯增多

4、，且形態(tài)也更為典型，存在相當(dāng)數(shù)量的包裹有內(nèi)容物的自噬泡。與正常組相比較，各組線粒體明顯增多，西藥組可見少量線粒體損傷。與正常組比較，NF-κB/P65、YNF-α各組IOD值和灰度值存在顯著差異(P＜0.05);中藥組、西藥組與模型組比較，中藥組、西藥組NF-κB/P65、TNF-α的IOD值和灰度值存在顯著差異（P＜0.05），中藥組與西藥組比較，NF-κB/P65的IOD值之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各項(xiàng)存在顯著差異（P＜

5、0.05）。
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功制造了非酒精性脂肪肝的大鼠模型，大鼠肝臟HE染色及電鏡顯示大鼠肝細(xì)胞脂肪變。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了細(xì)胞自噬參與非酒精性脂肪肝的發(fā)生和發(fā)展。脂肝方能夠降低非酒精性脂肪肝大鼠的血脂:TG、TC、HDL-c、LDL-c;肝功:ALT、AST。改善非酒精性脂肪肝大鼠肝臟炎癥程度和脂肪變程度;能夠降低非酒精性脂肪肝大鼠肝臟中TNF-α蛋白的表達(dá)，從而降低炎癥程度;能夠升高非酒精性脂肪肝大鼠肝臟中NF-κB/P65