絲膠對糖尿病腎病的保護作用及機制研究.pdf

1、目的：
　　 通過觀察絲膠對糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）模型大鼠腎臟的保護作用，一方面探討絲膠治療和預防DN的作用及機制，另一方面進一步深入探討DN的發(fā)病機制。
　　 方法：
　　 清潔級雄性SD大鼠60只，隨機分為5組：正常對照組、DN模型組、絲膠治療組、絲膠預防組和二甲雙胍治療組，每組12只。正常對照組大鼠，不做任何處理；模型組、絲膠預防組、絲膠治療組和二甲雙胍組大鼠均采用2％

2、STZ（25mg/kg/d，3d）腹腔注射建立DN動物模型。待模型成功建立后，模型組大鼠不再作任何處理；絲膠治療組大鼠給予絲膠（2.4g/kg/d）灌胃治療35天，二甲雙胍組大鼠給予二甲雙胍（55.33 mg/kg/d）灌胃治療，時間同絲膠治療組。絲膠預防組大鼠在注射STZ前給予絲膠（2.4g/kg/d）灌胃35天。
　　 分別檢測各組大鼠的血糖（blood glucose，BG）、24小時尿蛋白定量、腎重/體重、血肌酐和血尿素

3、氮；HE染色觀察腎的組織結(jié)構(gòu)；免疫組織化學染色觀察腎臟轉(zhuǎn)化生長因子-β，（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子-1（tissue inhibitors of maprix metalloproteinases-1，TIMP-1）和色素上皮衍生因子（pigmem epthelium-derived factor，PEDF）的表達：Western Blotting方法檢測腎臟

4、Smad3和血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）蛋白的表達。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組大鼠的BG：與正常對照組大鼠相比，模型組大鼠的BG明顯升高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預防組和二甲雙胍組大鼠的BG明顯低于模型組（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預防組與二甲雙胍組比較無明顯差別（P>0.05）。
　　 2.各組大鼠的24 h尿蛋白定量和腎

5、重/體重：與正常對照組大鼠相比，模型組大鼠的24 h尿蛋白定量和。腎重/體重明顯升高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預防組和二甲雙胍組大鼠的24 h尿蛋白定量明顯低于模型組（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預防組與二甲雙胍組比較無明顯差別（P>0.05）；絲膠治療組、絲膠預防組大鼠的腎重/體重明顯低于模型組（P<0.01），且明顯低于二甲雙胍組（P<0.05）。
　　 3.各組大鼠的血肌酐和尿素氮含量：模型組大鼠的血肌酐和尿

6、素氮含量較正常對照組大鼠顯著升高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預防組和二甲雙胍組大鼠的血肌酐和尿素氮含量明顯低于模型大鼠（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預防組與二甲雙胍組比較無明顯差別（P>0.05）。
　　 4.HE染色：（1）正常組：腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)清晰，未見異常改變。（2）模型組大鼠的。腎小球、腎小管均發(fā)生明顯病理變化：腎小囊腔較正常大鼠顯著擴張，部分血管球萎縮，偶見玻璃樣變性；部分腎小管上皮細胞腫脹、空泡變性；

7、間質(zhì)出現(xiàn)明顯淋巴細胞浸潤。（3）絲膠治療組大鼠腎臟病變的程度明顯減輕，但仍可見個別腎小囊腔增寬、部分腎小管上皮細胞排列紊亂。（4）絲膠預防組：未見明顯病理變化，腎組織結(jié)構(gòu)與正常組更為接近。
　　 5.各組大鼠腎臟Smad3和VEGF蛋白的表達：模型大鼠腎臟Smad3蛋白和VEGF蛋白的含量明顯高于正常對照組大鼠（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預防組和二甲雙胍組大鼠腎臟Smad3和VEGF蛋白表達明顯低于模型大鼠（P<0.01）

8、，且絲膠治療組、絲膠預防組與二甲雙胍組比較無明顯差別（P>0.05）。
　　 6.各組大鼠腎臟TGF-β1和FIMP-1蛋白的表達：TGF-β1和TIMP-1免疫陽性產(chǎn)物均呈棕黃色細膩顆粒狀，位于細胞漿；TGF-β1免疫陽性細胞包括腎小囊壁層上皮細胞、足細胞和球內(nèi)系膜細胞，TMP-1免疫陽性細胞為腎小球球內(nèi)系膜細胞。與正常對照組大鼠相比，模型大鼠腎臟TGF-β1和TIMP-1蛋白的表達明顯增高（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預

9、防組和二甲雙胍組大鼠腎臟TGF-β1和TIMP-1蛋白的表達明顯低于模型大鼠（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預防組與二甲雙胍組比較無明顯差別（P>0.05）。
　　 7.各組大鼠腎臟PEDF蛋白的表達：PEDF免疫陽性產(chǎn)物呈棕黃色顆粒狀，位于細胞漿，免疫陽性細胞為。腎小管上皮細胞。與正常對照組大鼠相比，模型大鼠腎臟PEDF蛋白的表達明顯下調(diào)（P<0.01）。絲膠治療組、絲膠預防組和二甲雙胍組大鼠腎臟PEDF蛋白的表達明顯高于

10、模型大鼠（P<0.01），且絲膠治療組、絲膠預防組與二甲雙胍組比較無明顯差別（戶>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.絲膠可降低DN大鼠血糖，改善DN大鼠的腎功能，對DN有一定的治療和預防作用。
　　 2.絲膠可抑制DN大鼠。腎臟TGF-β1/Smad3信號通路的激活，改善腎臟VEGF和PEDF蛋白的不平衡表達，下調(diào)腎臟TIMP-1蛋白的表達，對DN大鼠腎臟損傷具有保護和預防作用。
　　 3.絲膠預防和