磷脂與β-淀粉樣蛋白多肽(Aβ42)的相互作用研究及藥物篩選.pdf

1、阿爾茨海默病又稱老年癡呆癥,是在老年人中發(fā)病率極高的一種神經(jīng)退行性疾病。研究表明:β-淀粉樣蛋白多肽分子的異常聚集以及磷脂與β-淀粉樣蛋白多肽分子的相互作用可能是導致阿爾茨海默病的主要因為之一。本論文的主要工作有:
　　 (1)采用原子力顯微鏡(AFM)、硫代磺色素(ThT)熒光探針和紫外可見-吸收光譜法分別研究了pH值分別為3.5、5.2、8.0下,濃度為2μmol·L-1的Aβ42與磷脂間的相互作用。通過構(gòu)筑一個和人體大腦環(huán)

2、境近似的體系,以磷脂雙層支撐膜來模擬腦細胞的細胞膜,采用AFM現(xiàn)場監(jiān)測Aβ42在磷脂膜誘導下的聚集行為。AFM結(jié)果表明:低濃度的Aβ42的自聚集速度要比相應(yīng)環(huán)境的磷脂作用下的Aβ42的聚集速度慢,聚集程度小。磷脂作用下的Aβ42,在溶液環(huán)境pH為3.5時,Aβ42聚集的速度比較快,而且主要聚集為纖維狀；pH為5.2時,Aβ42聚集速度最慢,且主要聚集成球狀的寡聚體；pH為8.0時,Aβ42的聚集速度介于3.5與5.2之間,主要聚集狀態(tài)為

3、2-3 nm高的纖維細絲。支撐雙層磷脂膜可以誘導Aβ42的聚集；紫外.可見吸收光譜驗證了AFM的結(jié)果；ThT熒光探針法結(jié)果表明:隨著孵化時間的延長,磷脂囊泡作用下的Aβ42的熒光強度比單獨的Aβ42的熒光要弱,即磷脂囊泡可以抑制Aβ42的聚集。
　　 (2)以二茂鐵寡肽分子Fc-KLVFFK6為信標,分別利用AFM現(xiàn)場觀測和電化學方法研究了潛在藥物對Aβ42聚集物的影響作用。相關(guān)研究表明:Aβ42的球形寡聚體可以對生物膜造成不可

4、恢復的破壞,而Aβ42纖維對膜的損害隨著纖維的移除可以恢復,這說明Aβ42寡聚體對神經(jīng)元細胞的毒性大于Aβ42纖維對神經(jīng)細胞的毒性。本論文分別利用AFM和電化學方法,以神經(jīng)退行性疾病之一的阿爾海默病為例,建立了一種篩選治療神經(jīng)退行性疾病藥物的方法。AFM結(jié)果顯示:我們選擇的藥物能夠選擇性的消除細胞毒性比較大的Aβ42寡聚體從而阻斷其纖維化。電化學數(shù)據(jù)顯示:Fc-KLVFFK6分子信標與Aβ42的混合溶液,隨著孵化時間的延長,Fc-KLV