突觸相關蛋白在孤獨癥大鼠模型腦組織的研究.pdf

1、目的：本課題通過孤獨癥大鼠動物模型的建立，了解神經生長相關蛋白質(Growth associated protein,GAP-43)、神經粘附分子（Neural cell adhesion molecule1，CD56）及突觸素(synaptophysin,SYN)在孤獨癥動物模型前額葉皮質及海馬表達水平的研究，探索其與孤獨癥的相關性。
　　方法：1.通過對12.5天的孕鼠腹腔注射丙戊酸鈉（Valproate，VPA）的方法建立孤

2、癥大鼠的動物模型，并用相關的實驗指標評估孤獨癥模型的可靠性。評估主要包括孕鼠產對照組及模型組數(shù)量、形態(tài)、生長發(fā)育的檢測（體重、睜眼時間）及行為學測試（負向性檢測、自梳理實驗、敞箱實驗、三箱實驗）。將孤獨癥模型組與對照組的相關指標進行對比，評估模型建造的成功與否。2.通過蛋白免疫印跡實驗(Western blot)方法，檢測GAP-43、CD56及突觸素在孤獨癥大鼠模型中的表達水平，通過免疫組織化學方法了解不同年齡的孤獨癥模型及對照組大鼠

3、額葉及海馬突觸素的表達水平。
　　結果：1.比較孤獨癥模型組與對照組：與正常對照組相比，模型組涂片檢查光學顯微鏡觀察結果顯示大鼠精液涂片在低倍鏡下呈團塊樣物質，而在高倍鏡下精子則呈密集無規(guī)則分布、分頭尾兩部分，頭部呈鐮刀形，尾部細長;模型組產仔數(shù)量顯著降低;睜眼時間較早;方向感覺及運動機能等的總體發(fā)育水平遲緩;形態(tài)學上模型組大鼠其尾部呈卷曲畸形，且具有刻板、重復行為,這些表現(xiàn)與Schneider等人制作出的孤獨癥模型表現(xiàn)一致，這些

4、均表明利用VPA腹腔注射法較為成功的復制出了孤獨癥的動物模型。2.Western blot結果顯示：孤獨癥模型組與對照組相比，GAP-43、CD56及突觸素在大鼠前額葉皮質及海馬區(qū)均有表達。出生后當日記為 P1，P14、P21及 P42時，前額葉皮質及海馬中 GAP-43及突觸素的表達高于對照組(P<0.05)；P14、P21及P42時，前額葉皮質及海馬中CD56表達模型組低于對照組(P<0.05)。3.免疫組織化學結果顯示：突觸素在大