PDC對(duì)高糖環(huán)境下INS-1細(xì)胞胰島素分泌、NO產(chǎn)生和IL-1β表達(dá)的影響.pdf

1、【目的】
　　觀察鐵皮石斛多糖對(duì)高糖環(huán)境下INS-1細(xì)胞胰島素分泌、一氧化氮(Nitrogen monoxidum, NO)產(chǎn)生和白介素-1β(Interleukin-1β, IL-1β)表達(dá)的影響，探討鐵皮石斛多糖降血糖和保護(hù)胰島β細(xì)胞的可能機(jī)制。
　　【方法】
　　大鼠胰島β細(xì)胞瘤株INS-1細(xì)胞用高糖(33.3 mmol/L)孵育48小時(shí)誘導(dǎo)損傷，同時(shí)用鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）處理細(xì)胞48

2、小時(shí)。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、高糖組、不同劑量鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）組和高糖+不同劑量鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）組。采用MTT法和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡，并計(jì)算細(xì)胞凋亡率。收集細(xì)胞培養(yǎng)液，分別采用硝酸還原酶法和放免法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液中NO和胰島素的水平。采用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)細(xì)胞中IL-1βmRNA的表達(dá)和Western blot檢測(cè)細(xì)胞中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(Inducible nit

3、ricoxide synthase, iNOS)蛋白的表達(dá)。
　　【結(jié)果】
　?。?）與對(duì)照組相比，高糖組 INS-l細(xì)胞活力顯著降低（P<0.05），細(xì)胞凋亡率顯著增加（P<0.05），培養(yǎng)液中胰島素水平明顯下降（P<0.05），培養(yǎng)液中NO的水平顯著增加（P<0.05），INS-1細(xì)胞中IL-1βmRNA的表達(dá)及iNOS蛋白表達(dá)顯著增加（均P<0.05）。
　?。?）與對(duì)照組相比，鐵皮石斛多糖（100、200和40

4、0μg/mL）沒(méi)有顯著影響細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡（均P＞0.05），也沒(méi)有影響培養(yǎng)液中NO的水平和iNOS蛋白表達(dá)（均P＞0.05），但是鐵皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）以濃度依賴的方式增加培養(yǎng)液中胰島素水平和INS-1細(xì)胞中IL-1β mRNA的表達(dá)（均P<0.05）。
　　（3）與高糖組相比，高糖+鐵皮石斛（100、200和400μg/mL）組INS-l細(xì)胞活力顯著增加（P<0.05），細(xì)胞凋亡率顯著降低（P<0.