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文檔簡介
1、目的:研究巰基氧化還原試劑對INS-1細胞株胰島素分泌的影響及其可能的分子機制。
方法:1.傳代培養(yǎng)胰島素分泌細胞株大鼠細胞素瘤INS-1細胞,將其種植在24孔板上,待其生長匯合至70-80%時分組進行胰島素分泌實驗。
2.應(yīng)用胰島素放射免疫分析技術(shù)觀察2,2'-二硫二吡啶(DTDP)、2-2'-二硫代雙(DTBNP)和二硫蘇糖醇(DTT)對 INS-1細胞葡萄糖刺激的胰島素分泌的影響。
3.應(yīng)用胰島素放射
2、免疫分析技術(shù)觀察DTDP、DTBNP和DTT對INS-1細胞KCl刺激的胰島素分泌的影響。
4.應(yīng)用胰島素放射免疫分析技術(shù)分別觀察硝苯地平(Nifedipine)阻斷L-型CaV通道、IP3受體和二氮嗪(Diazoxide)阻斷KATP通道對DTDP、DTBNP調(diào)節(jié)INS-1細胞葡萄糖刺激的胰島素分泌的影響。
5.應(yīng)用胰島素放射免疫分析技術(shù)分別觀察硝苯地平(Nifedipine)阻斷L-型CaV通道、IP3受體和二氮
3、嗪(Diazoxide)阻斷KATP通道對DTDP、DTBNP調(diào)節(jié)INS-1細胞KCl刺激的胰島素分泌的影響。
結(jié)果:1.在INS-1細胞的胰島素分泌實驗中DTDP、DTBNP均能增加葡萄糖刺激的胰島素分泌,且均可以被DTT所消除;
2.在INS-1細胞的胰島素分泌實驗中DTDP、DTBNP均能增加KCl刺激的胰島素分泌,且均可以被DTT所消除;
3.在Nifedipine預(yù)先處理的INS-1細胞胰島素分泌
4、實驗中DTDP、DTBNP均能增加葡萄糖刺激的胰島素分泌,但胰島素分泌增加幅度低于無Nifedipine處理組;4.在Diazoxide預(yù)先處理的INS-1細胞胰島素分泌實驗中DTDP、DTBNP均能增加葡萄糖刺激的胰島素分泌,但胰島素分泌增加幅度低于無Diazoxide處理組。
5.在Nifedipine預(yù)先處理的INS-1細胞胰島素分泌實驗中DTDP、DTBNP均能增加KCl刺激的胰島素分泌,但胰島素分泌增加幅度低于無Ni
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