白子菜對(duì)HepG2細(xì)胞（人肝癌細(xì)胞株）胰島素抵抗的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：以白子菜提取物為研究對(duì)象，采用HepG2細(xì)胞，運(yùn)用現(xiàn)代藥理學(xué)研究方法，探討白子菜對(duì)胰島素抵抗的影響及其機(jī)制。
　　方法：用葡萄糖臨床檢測試劑盒檢測白子菜對(duì)正常HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗的影響；用四甲基偶氮唑鹽(MTT)方法檢測HepG2細(xì)胞的增殖；采用高胰島素誘導(dǎo)方法，通過優(yōu)化胰島素濃度和胰島素作用時(shí)間建立適宜的高濃度胰島素誘發(fā)的細(xì)胞胰島素抵抗模型；用葡萄糖臨床檢測試劑盒檢測白子菜對(duì)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗的影響；藥

2、物作用結(jié)束后收集細(xì)胞，細(xì)胞裂解液作用20min，于離心機(jī)上12000rp，4℃離心15min，取上清液分別采用葡萄糖-6-磷酸脫氫酶偶聯(lián)比色法、乳酸脫氫酶偶聯(lián)比色法、鉬酸銨定磷法及蒽酮法測定胰島素抵抗HepG2細(xì)胞內(nèi)葡萄糖激酶(GK)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性和糖原含量。
　　結(jié)果：在含葡萄糖濃度為10.0mmol/L的DMEM培養(yǎng)基中，白子菜可促進(jìn)正常HepG2細(xì)胞的葡萄

3、糖消耗，作用最強(qiáng)為濃度1.0mg/mL；白子菜對(duì)HepG2細(xì)胞增殖無影響；將HepG2細(xì)胞臵于10-8mol/L的胰島素中36h，HepG2細(xì)胞對(duì)胰島素的作用產(chǎn)生抵抗；將細(xì)胞臵于不含胰島素的培養(yǎng)基中48h，發(fā)現(xiàn)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞的葡萄糖消耗仍明顯低于對(duì)照細(xì)胞，表明HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型在48h內(nèi)維持對(duì)胰島素產(chǎn)生抗性的特征；白子菜能夠促進(jìn)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗，作用最強(qiáng)為濃度1.0mg/mL；白子菜可降低胰島素抵

4、抗HepG2細(xì)胞內(nèi)葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的活性，增強(qiáng)葡萄糖激酶的活性和增加糖原含量，改善HepG2細(xì)胞胰島素抵抗的狀態(tài)。
　　結(jié)論：白子菜可促進(jìn)正常 HepG2細(xì)胞的葡萄糖消耗；白子菜對(duì)HepG2細(xì)胞增殖無影響；運(yùn)用高胰島素誘導(dǎo)培養(yǎng)法可以復(fù)制出穩(wěn)定可靠的胰島素抵抗HepG2細(xì)胞模型，HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型在48h內(nèi)維持對(duì)胰島素產(chǎn)生抗性的特征；白子菜可明顯地促進(jìn)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗；白子菜可降