亞硒酸鈉誘導HepG2細胞胰島素抵抗的作用及機制研究.pdf

1、硒是哺乳動物的一種必需微量元素。研究表明，硒具有類胰島素作用；而近來越來越多的研究表明，缺硒和硒過量會促進糖尿病的發(fā)生發(fā)展，但內在的機理仍然知之甚少。胰島素抵抗在2型糖尿病的發(fā)病機理中極其重要。因此，硒與胰島素抵抗之間關系的研究對深入了解硒與糖尿病的關系具有重要意義，對預防和治療2型糖尿病具有潛在的應用價值。
　　本文以亞硒酸鈉Na2SeO3處理的HepG2細胞為研究對象，研究了亞硒酸鈉對胰島素效應與信號通路的影響及其機制，重點探

2、討了高濃度亞硒酸鈉（1μM，2.5μM和5μM）對HepG2細胞的糖代謝（包括糖原合成和糖異生）、肝臟細胞中胰島素信號通路、氧化應激水平、內質網(wǎng)應激水平的影響，主要結果如下：
　　我們采用糖原試劑盒、實時熒光定量PCR技術、蛋白質印跡技術、分光光度法、活性氧試劑盒，研究了亞硒酸鈉對HepG2細胞胰島素信號通路的影響及可能的機制。結果表明，高濃度亞硒酸鈉使得HepG2細胞內糖原含量降低，促進了糖異生基因的表達，降低了Akt的磷酸化水

3、平。這說明高濃度亞硒酸鈉導致胰島素敏感性降低，抑制胰島素信號傳導，引起胰島素抵抗。亞硒酸鈉的加入沒有改變GRP78的表達，說明在HepG2細胞中，亞硒酸鈉可能不是或主要不是通過內質網(wǎng)應激引起胰島素抵抗的。高硒處理使細胞中 ROS含量增加，加入抗氧化劑 N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）可以降低高硒引起的ROS水平升高。NAC的加入可以逆轉由亞硒酸鈉導致的糖原合成減少和糖異生基因表達增加，這說明亞硒酸鈉是通過RO