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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 研究不同濃度葡萄糖對(duì)神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞IL-1β(白介素-1β)、IL-6(白介素-6)表達(dá)的影響,以及天麻素對(duì)高濃度葡萄糖誘導(dǎo)的神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞IL-1β、IL-6表達(dá)的影響。 方法: 將體外培養(yǎng)的小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞(BV-2細(xì)胞)分成:對(duì)照組,低、中、高濃度(30 mmol·L-1、35 mmol·L-1、45 mmol·L-1)葡萄糖組,低、中、高濃度(25mg·L-1,50mg·L-1,100mg·L-1
2、)天麻素高糖組,培養(yǎng)24 h,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定培養(yǎng)上清中IL-1β,IL-6蛋白濃度,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法評(píng)價(jià)IL-1β,IL-6 mRNA表達(dá)。 結(jié)果: 1.不同葡萄糖濃度的影響:與對(duì)照組相比,加入高濃度葡萄糖各組培養(yǎng)24小時(shí)后,神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞易聚集,胞體、胞核變大,枝狀突起明顯,胞漿內(nèi)顆粒物增多,且隨著葡萄糖濃度升高,變化更加明顯。當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)上清液
3、中葡萄糖濃度為30mmol/L時(shí),培養(yǎng)上清液中IL-1β、IL-6升高不明顯,與對(duì)照組相比,無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05):當(dāng)培養(yǎng)液葡萄糖濃度為35 mmol·L-1及45 mmol·L-1時(shí),培養(yǎng)上清液中IL-1β、IL-6明顯升高,與對(duì)照組相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。實(shí)驗(yàn)各組培養(yǎng)24h后,IL-1β和IL-6mRNA的表達(dá)量均明顯增加,與對(duì)照組相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),且隨著培養(yǎng)液中葡萄糖濃度增高,其
4、表達(dá)也增高。 2.天麻素的影響:與對(duì)照組相比,高糖組(45 mmol·L-1)培養(yǎng)24小時(shí)后,神經(jīng)小膠質(zhì)瘤細(xì)胞易聚集,胞體、胞核變大,枝狀突起明顯,胞漿內(nèi)顆粒物增多,加不同濃度天麻素后上述變化減輕。對(duì)照組細(xì)胞IL-1β、IL-6蛋白和mRNA表達(dá)水平很低,高糖組IL-1β、IL-6蛋白和mRNA表達(dá)明顯增加,與對(duì)照組相比,具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),用天麻素干預(yù)后IL-1β、IL-6蛋白的mRNA表達(dá)降低,與高糖組相比,
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