牡丹組織培養(yǎng)技術的初步研究.pdf

1、本文以牡丹不同品種的鱗芽和帶有腋芽的莖段為外植體，探討了不同的消毒方式及消毒時間對外植體消毒的影響；研究不同的基本培養(yǎng)基、不同的植物生長調劑物質、不同的附加物質和不同的環(huán)境因子在腋芽的誘導、增殖以及壯苗生長過程中的作用，分析了不同培養(yǎng)過程中主要影響因子及其有效濃度使用范圍；同時以健壯的無菌試管苗為材料，探討了愈傷組織誘導和增殖過程中主要的影響因子及其有效的濃度范圍；同時又以花藥為外植體，探討了愈傷組織誘導過程中主要的影響因子及其有效的濃

2、度范圍。實驗結果如下： 1、在外植體的消毒試驗中，以0.1％HgCl2為消毒劑進行消毒處理，結果表明：牡丹鱗芽適合的消毒方式為二次消毒，適合的時間為6min/6min，帶有腋芽的莖段消毒時間較鱗芽短，時間以6min為宜。 2、以‘烏龍捧盛，、‘洛陽紅’、‘魯荷紅’、‘肉芙蓉’和‘趙粉’5個牡丹品種的鱗芽為外植體進行誘導培養(yǎng)，結果表明：品種以‘烏龍捧盛’和‘魯荷紅’表現(xiàn)較好，采集時間以1～2月份為宜，其誘導率分別為88％和

3、82％。 3、以‘烏龍捧盛，和‘魯荷紅’為材料進行增殖培養(yǎng)，結果表明：2品種的無菌試管苗在增殖過程中，適宜的基本培養(yǎng)基為改良MS，適宜的細胞分裂素為TDZ，濃度以0.1mg·L-1時效果較好；繼代3次時2個品種無菌試管苗增殖系數(shù)最高，分別為5.2和5.3；光質比例可調節(jié)的LED光源對牡丹無菌試管苗的增殖和生長狀況均無明顯的促進作用；普通熒光燈，當光照強度為30001x時，能明顯的促進試管苗的生長，出現(xiàn)黃化現(xiàn)象的葉片較少，葉片顏色

4、較低光強下深，植株較低光強下高、健壯；CO2施肥和不同濃度的蔗糖對牡丹無菌試管苗的增殖無促進作用，但當CO2為3000ppm、蔗糖濃度為20g·L-1時，試管苗的生長狀況良好，新出葉片顏色濃綠，植株較高，只有外圍葉片出現(xiàn)黃化。 4、以‘烏龍捧盛，和‘魯荷紅’為材料進行壯苗培養(yǎng)，試驗結果表明：水解乳蛋白、酪蛋白和亞精胺對這2個品種無菌試管苗的生長無明顯的促進作用，而PP333能夠有效的減少無菌試管苗生長過程中黃葉的出現(xiàn)，濃度以1.

5、0mg·L-1效果較好，但植株較矮，植株呈現(xiàn)深綠色。 5、以‘烏龍捧盛，的無菌試管苗為材料進行愈傷組織誘導，試驗結果表明：薄細胞層的厚度對愈傷組織誘導影響最大，最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+TDZ0·05mg·L-1+2,4-D5.0mg·L-1+AgNO30.2mg·L-1，片層厚度為0.5～0.8mm效果最佳。 6、在愈傷組織的繼代培養(yǎng)中，試驗結果表明：活性炭能有效的抑止

6、褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生，用量為0.1％效果較好，蔗糖和多胺對愈傷組織的生長沒有明顯的促進作用，隨著蔗糖和多胺濃度的增加，愈傷組織出現(xiàn)自然死亡現(xiàn)象。 7、以‘洛陽紅，的花藥為外植體進行愈傷組織誘導，試驗結果表明：花藥誘導愈傷組織誘導的最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA0.5mg·L+NAA3.0mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1+TDZ0.05mg·L-1，消毒時間以3min為宜。 8、以‘烏龍捧盛’的無菌試管苗為材料進行生根培