紅毛藻多糖的提取純化及其性質(zhì)的研究.pdf

1、紅毛藻(Bangia fusco-purpurea)是我國(guó)福建南日島一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高且多糖含量豐富的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖海藻。本文系統(tǒng)地研究了紅毛藻多糖的提取、分離純化工藝及其理化性質(zhì)，并對(duì)紅毛藻多糖的體外抗氧化活性做了初步的探索。 以多糖的提取率與硫酸根含量為指標(biāo)，比較了熱水、冷水、稀酸、稀堿提取紅毛藻多糖的效果，發(fā)現(xiàn)用熱水提取紅毛藻多糖提取率與硫酸根含量最高，故選用熱水作為提取溶劑。通過(guò)單因素與正交實(shí)驗(yàn)確定了熱水提取的最佳工藝參數(shù)為：浸提

2、溫度90℃，浸提時(shí)間2小時(shí)，料液比1:30，浸提次數(shù)3次，在此優(yōu)化的條件下得到多糖提取率為5.97％；采用超聲波輔助熱水提取紅毛藻多糖，通過(guò)單因素與正交實(shí)驗(yàn)確定了最佳工藝參數(shù)為浸提溫度為80 ℃，浸提時(shí)間為80 min，料液比1:70，超聲波功率200 W，在最佳條件下多糖的提取率為9.69％；用乙醇沉淀多糖時(shí)乙醇的最佳終濃度為75％，多糖提取液的最佳濃縮比為1:3，此時(shí)的沉淀率為90.77％。 用熱水提取的紅毛藻粗多糖中含有大

3、量的雜蛋白，本文比較了Sevag法、TCA法、中性蛋白酶法及堿性蛋白酶法去除紅毛藻粗多糖中的蛋白質(zhì)，使用這四種脫蛋白方法的脫除率分別為78.50％、56.56％、90.67％和96.77％，多糖的損失率分別為56.50％、10.63％、7.95％、9.80％，可見(jiàn)，酶法脫蛋白的效果好且多糖的損失較少。 用陰離子交換柱DEAE Cellulose-52對(duì)紅毛藻多糖進(jìn)行分級(jí)分離分別用0 mol/L、0.1 mol/L、0.3 mol

4、/L、0.5 mol/L及2 mol/L的NaCl進(jìn)行分段梯度洗脫，在鹽離子濃度為0.1 mol/L、0.3 mol/L和0.5 mol/L處分別得到三個(gè)多糖峰并命名為BPⅠ、BPⅡ和BPⅢ。接著用凝膠過(guò)濾柱Sephadex G-100對(duì)上述三個(gè)組分的多糖繼續(xù)進(jìn)行純化，結(jié)果表明，凝膠過(guò)濾柱Sephadex G-100可對(duì)BPⅠ、BPⅡ和BPⅢ三個(gè)多糖組分中的小蛋白有效去除，但BPⅠ中還有一部分蛋白與多糖結(jié)合在一起，可能是一種糖蛋白。經(jīng)紫

5、外光譜分析與凍融分析均表明上述三種多糖為較純的多糖組分，把Sephadex G-100柱純化的多糖組分分別命名為BPSⅠ、BPSⅡ和BPSⅢ。 測(cè)定三種多糖的硫酸根含量，發(fā)現(xiàn)BPSⅢ的硫酸根含量最高，其次是BPSⅡ，而B(niǎo)PSⅠ含量最低，且多糖的純度越高硫酸根含量越高。氣相色譜分析結(jié)果表明，BPSⅠ、BPSⅡ的單糖組分主要由半乳糖組成，而B(niǎo)PSⅢ除含有半乳糖外還含有少量木糖，其摩爾比為11: 1。分析三種多糖的紅外光譜可知三種多糖均

6、含有β-D-半乳糖，硫酸根的位置均在C6位上，BPSⅠ中含有3,6-內(nèi)醚，BPSⅡ和BPSⅢ不含3,6-內(nèi)醚。 測(cè)定紅毛藻粗多糖(BP)、BPSⅠ、BPSⅡ和 BPSⅢ四種多糖的體外抗氧化活性，結(jié)果表明，BP、BPSⅠ、BPSⅡ、BPSⅢ對(duì)·OH自由基的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為4.98 mg/mL、1.22 mg/mL、13.86 mg/mL和1.78 mg/mL；對(duì)DPPH自由基的IC50值分別為0.70 mg/mL、1.