頸交感神經(jīng)不同功能狀態(tài)對(duì)周圍神經(jīng)慢性卡壓傷的影響.pdf

1、第一部分頸交感神經(jīng)不同功能狀態(tài)對(duì)周圍神經(jīng)慢性卡壓傷的影響
　　交感神經(jīng)屬于自主神經(jīng)系統(tǒng)，但從解剖學(xué)上分，交感神經(jīng)節(jié)后纖維是周圍神經(jīng)組成部分。在正常生理狀態(tài)下，交感神經(jīng)系統(tǒng)與周圍感覺神經(jīng)系統(tǒng)極少發(fā)生解剖學(xué)上的直接聯(lián)系，周圍感覺傳入神經(jīng)及其末梢感受器也極少受交感神經(jīng)影響(Janig&Koltzenburg，1991)。但在病理?xiàng)l件下(如周圍神經(jīng)慢性卡壓傷)，由于神經(jīng)瓦勒變性，產(chǎn)生神經(jīng)生長(zhǎng)因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，誘導(dǎo)交感神經(jīng)芽生，形成交感一

2、感覺耦聯(lián)作用，或通過影響周圍神經(jīng)血供，參與了神經(jīng)病理性疼痛的形成和維持。周圍神經(jīng)急性切斷傷后，交感封閉促進(jìn)其再生，而交感切除則不利于其再生，提示交感神經(jīng)對(duì)周圍神經(jīng)損傷后再生的影響，可能與交感神經(jīng)功能狀態(tài)有關(guān)。既往有關(guān)交感神經(jīng)對(duì)周圍神經(jīng)功能影響的研究主要針對(duì)慢性疼痛和神經(jīng)急性損傷后再生方面，那么，交感神經(jīng)對(duì)受慢性卡壓傷的周圍神經(jīng)損傷程度，以及去除卡壓后神經(jīng)功能恢復(fù)有無(wú)影響?與交感神經(jīng)功能狀態(tài)是否有關(guān)?目前尚無(wú)這方面的文獻(xiàn)報(bào)道。
　　

3、本研究旨在探討交感神經(jīng)不同功能狀態(tài)對(duì)受慢性卡壓傷的周圍神經(jīng)損傷程度的影響，以及慢性卡壓松解后，交感神經(jīng)不同功能狀態(tài)對(duì)周圍神經(jīng)功能恢復(fù)的影響。
　　實(shí)驗(yàn)一：交感神經(jīng)不同功能狀態(tài)對(duì)受慢性卡壓的周圍神經(jīng)損傷的影響
　　實(shí)驗(yàn)材料
　　一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
　　雄性體重約200g SD大鼠32只，由復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。
　　二、主要試劑
　　Trizol購(gòu)于invitrogen公司，RevertAid Firs

4、t Strand cDNA Synthesis Kit購(gòu)自Fermentas公司，F(xiàn)astStart Universal SYBR Green Master(ROX)購(gòu)自Roche公司，P物質(zhì)、S100b以及GAPDH引物由上海生工生物工程有限公司合成。
　　三、實(shí)驗(yàn)儀器
　　手提式高速電動(dòng)離散器(美國(guó)biospee)，4℃離心機(jī)，紫外分光光度儀，Opticon-2 PCR循環(huán)儀，Leica FW4000圖像分析系統(tǒng)，Med

5、tronic肌電圖儀。
　　實(shí)驗(yàn)方法
　　將32只SD大鼠分成A1、B1、C1三個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)正常對(duì)照組D，每組8只。頸正中入路，左側(cè)為實(shí)驗(yàn)側(cè)，顯露臂叢下干，參照Machinnon坐骨神經(jīng)慢性卡壓傷模型制作方法制作大鼠左臂叢下干慢性卡壓傷動(dòng)物模型。C1組在制作下干卡壓模型同時(shí)切除左側(cè)頸中神經(jīng)節(jié)。B1組造模術(shù)后2個(gè)月，以0.25％布比卡因0.5ml作頸中神經(jīng)節(jié)阻滯，每日一次，共1個(gè)月。三組造模術(shù)后滿3個(gè)月，去除卡壓，檢測(cè)骨間肌

6、CMAP，記錄波幅和潛伏期。取卡壓遠(yuǎn)段神經(jīng)計(jì)數(shù)有髓纖維和檢測(cè)S100bmRNA表達(dá)水平，取C8T1背根節(jié)檢測(cè)P物質(zhì)mRNA表達(dá)水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　1、去卡壓后A1(完全交感功能)、B1(抑制交感功能)、C1(去除交感)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組D行電生理檢測(cè)其左側(cè)第一骨間肌CMAP，潛伏期均數(shù)A1>B1>C1>D，分別為：(4.8±0.9)ms、(4.3±0.6)ms、(3.9±0.5)ms、(2.8±0.2)ms，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分

7、析，A1、B1、C1三組潛伏期間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.047)。波幅均數(shù)A1　　2、卡壓遠(yuǎn)段有髓纖維數(shù)A1

8、方差分析，A1、B1、C1三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)。
　　3、卡壓遠(yuǎn)段神經(jīng)檢測(cè)的S100bmRNA表達(dá)相對(duì)定量A1>B1>C1，分別為：(8.05±3.47)×10-3、(5.95±2.51)×10-3、(2.69±0.92)×10-3，經(jīng)方差分析，三者有著性差異(P=0.001)，且均顯著高于正常表達(dá)水平(0.52±0.15)×10-3，(P=0.000)。
　　4、卡壓側(cè)C8T1背根節(jié)中SP mRNA表達(dá)水

9、平相對(duì)定量A1>B1>C1，分為：(3.62±0.83)×10-2、(2.95±0.72)×10-2、(2.24±0.73)×10-2，經(jīng)方差分析，三者有顯著性差異(P=0.006)，且均高于正常水平(1.21±0.28)×10-2。
　　結(jié)論
　　1、周圍神經(jīng)卡壓性疾病的發(fā)展除機(jī)械卡壓因素外，交感神經(jīng)在疾病的發(fā)展過程中也起著重要作用：
　　2、異常的交感神經(jīng)功能越強(qiáng)，則卡壓引起的疼痛癥狀越重，卡壓神經(jīng)結(jié)構(gòu)性損傷也越大

10、，去除病態(tài)的交感神經(jīng)有利于卡壓損傷程度的減輕；
　　3、過高表達(dá)的P物質(zhì)和S100b蛋白，可能是交感神經(jīng)參與卡壓性疾病發(fā)展的介質(zhì)之一。
　　實(shí)驗(yàn)二、交感神經(jīng)不同功能狀態(tài)對(duì)周圍神經(jīng)卡壓后神經(jīng)功能恢復(fù)的影響
　　實(shí)驗(yàn)材料
　　一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
　　雄性體重約200g SD大鼠24只，由復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供。
　　二、主要試劑
　　Trizol購(gòu)于invitrogen公司，RevertAid Fir

11、m Strand cDNA Synthesis Kit購(gòu)自Fermentas公司，F(xiàn)astStartUniversal SYBR Green Master(ROX)購(gòu)自Roche公司，P物質(zhì)、S100b以及GAPDH引物由上海生工生物工程有限公司合成。
　　三、實(shí)驗(yàn)儀器
　　手提式高速電動(dòng)離散器(美國(guó)Nospee)，4℃離心機(jī)，紫外分光光度儀，Opticon-2 PCR循環(huán)儀，Leica FW4000圖像分析系統(tǒng)，Medtr

12、onic肌電圖儀。
　　實(shí)驗(yàn)方法
　　將24只SD大鼠分成A2、B2、C2三組，每組8只。頸正中入路，左側(cè)為實(shí)驗(yàn)側(cè)，顯露臂叢下干，參照Machinnon坐骨神經(jīng)慢性卡壓傷模型制作方法制作大鼠左臂叢下干慢性卡壓傷動(dòng)物模型。卡壓滿3個(gè)月，A2組去除卡壓，不處理頸交感神經(jīng)，繼續(xù)飼養(yǎng)1個(gè)月；B2組去除卡壓后，以0.25％布比卡因行頸中神經(jīng)節(jié)封閉，每日1次，共1個(gè)月；C2組去除卡壓同時(shí)切除頸中神經(jīng)節(jié)及其支配臂叢的分支，繼續(xù)飼養(yǎng)1個(gè)月。

13、三組動(dòng)物在去卡壓后1個(gè)月，檢測(cè)骨間肌CMAP，記錄波幅和潛伏期。取卡壓遠(yuǎn)段神經(jīng)計(jì)數(shù)有髓纖維和檢測(cè)S100bmRNA表達(dá)水平，取C8T1背根節(jié)檢測(cè)P物質(zhì)mRNA表達(dá)水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　1、A2(完全交感功能)、B2(抑制交感功能)、C2(去除交感)三組行電生理檢測(cè)左側(cè)骨間肌CMAP的潛伏期A2>B2>C2，分別為：(3.8±0.6)ms、(3.6±0.4)ms、(3.2±0.3)ms，波幅A2

14、2±1.1)mv、(3.6±1.3)mv、(4.3±1.8)mv。經(jīng)方差分析，三組潛伏期有顯著性差異(P=0.04)，波幅差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.244)。
　　2、卡壓遠(yuǎn)段有髓纖維數(shù)A2　　3、卡壓遠(yuǎn)段神經(jīng)檢測(cè)的S100bmRNA表達(dá)相對(duì)定量A2>B2>C2，分別為：(5.39±1

15、.19)×10-3、(1.76±0.32)×10-3、(1.03±0.39)×10-3，經(jīng)方差分析，三者有著性差異(P=0.001)。但仍高于正常水平(0.52a=0.15)×10-3。
　　4、卡壓側(cè)C8T1背根節(jié)中SP mRNA表達(dá)水平相對(duì)定量A2>B2>C2，分為：(3.16±1.03)×10.2、(2.36±0.68)×10-2、(1.49±0.80)×10-2，經(jīng)方差分析，三者有顯著性差異(P=0.003)。
　　

16、結(jié)論
　　1、在周圍神經(jīng)卡壓性疾病的治療過程中，除去除機(jī)械性卡壓因素外，降低異常功能的交感神經(jīng)的興奮性，有利于受卡壓的周圍神經(jīng)再生和功能恢復(fù)，疼痛癥狀消退。
　　2、異常的交感神經(jīng)功能越低，則去卡壓后受卡壓的周圍神經(jīng)功能恢復(fù)越好。
　　3、降低異常功能的交感神經(jīng)興奮性促進(jìn)慢性卡壓后神經(jīng)再生和功能恢復(fù)、疼痛緩解可能是通過減少P物質(zhì)和S100b蛋白等介質(zhì)引起的炎癥反應(yīng)和損傷作用，創(chuàng)造一個(gè)有利于神經(jīng)功能恢復(fù)的生理環(huán)境而起作用

17、。
　　第二部分交感神經(jīng)功能狀態(tài)臨床檢測(cè)方法的改良
　　交感神經(jīng)皮膚反應(yīng)(sympathetic skin response，SSR)是目前臨床上檢測(cè)交感神經(jīng)功能的一種無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)便、可靠的手段。手掌部為最常采用的檢測(cè)部位，電刺激為最常采用的刺激方法。然而手掌部記錄不能反應(yīng)單神經(jīng)通路上交感傳出功能狀態(tài)，因此，本實(shí)驗(yàn)將檢測(cè)部位進(jìn)行適當(dāng)改良，以尺、正中神經(jīng)絕對(duì)支配區(qū)為檢測(cè)部位，研究絕對(duì)支配區(qū)SSR特點(diǎn)，并建立正常參考值。
　　

18、研究對(duì)象與方法
　　一、研究對(duì)象
　　1、健康自愿者60例，其中男31例，女29例，年齡18～54歲，平均32.4歲。30例檢測(cè)右側(cè)，30例檢測(cè)左側(cè)。
　　2、尺神經(jīng)損傷者10例，其中男6例，女4例，平均年齡32.3歲。右側(cè)7例，左側(cè)3例，損傷時(shí)間為3個(gè)月以內(nèi)。
　　3、正中神經(jīng)完全損傷10例，男7例，女3例，平均年齡35.1歲。左右側(cè)各5例，損傷時(shí)間為3個(gè)月以內(nèi)。
　　4、正中神經(jīng)和尺神經(jīng)均損傷共3例，男

19、2例，女1例，平均年齡28歲，損傷部位均為腕部，損傷時(shí)間1個(gè)月。
　　二、研究方法
　　1、檢測(cè)部位：掌心、示指腹和小指腹。
　　2、條件要求：室溫、明亮、安靜環(huán)境，受試者放松，皮溫32～36℃。
　　3、檢查儀器：神經(jīng)肌電圖儀。
　　4、檢查方法：直流方波0.2ms，強(qiáng)度10～30mA,電刺激對(duì)側(cè)正中神經(jīng)，表面電極記錄SSR的潛伏期和波幅。
　　結(jié)果
　　1、左右手SSR檢查結(jié)果：掌心、示指指

20、腹和小指指腹SSR潛伏期和波幅左右側(cè)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　2、不同性別SSR檢查結(jié)果：掌心、示指和小指記錄的SSR的潛伏期平均值男性較女性長(zhǎng)，但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。波幅均值男性較女性大的趨勢(shì)。
　　3、正常者掌心、示指腹和小指腹的SSR的潛伏期分別為：(1.38±0.15)s、(1.54±0.22)s、(1.59±0.23)s，波幅分別為：(3.78±2.37)mv、(2.26±1.52)mv

21、、(2.46±1.84)mv。示、小指腹記錄的SSR的潛伏期較掌心部位長(zhǎng)，波幅較掌心部位低(潛伏期P<0.01，波幅P<0.01)。示指腹和小指腹記錄的SSR的潛伏期和波幅，兩部位比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　4、正中神經(jīng)損傷后，其絕對(duì)支配區(qū)(示指腹)SSR消失，掌心部位SSR潛伏期略延長(zhǎng)，與正常者相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但波幅明顯變低(P=0.000)，小指腹SSR不受影響。尺神經(jīng)損傷后，其絕對(duì)支配區(qū)(小指腹)S

22、SR消失，掌心部位SSR不受明顯影響，示指腹SSR不受影響。尺神經(jīng)和正中神經(jīng)二者均損傷，則手掌部任何部位SSR消失。
　　5、SSR正常參考值：掌心部位潛伏期和波幅分別為：≤1.69s和0～8.52mv；示、小指腹部位SSR的潛伏期和波幅分別為：≤2.00s和0～5.73mv。
　　結(jié)論
　　1、手掌部、指腹均可檢測(cè)到SSR，與掌心部位相比，指腹處SSR潛伏期長(zhǎng)，波幅小。左右側(cè)同一部位SSR無(wú)差別。女性SSR波幅有較男