乙肝病毒外膜大蛋白在乙型肝炎檢測中的應用.pdf

1、目的: 目前，全球約有3.5億慢性HBV攜帶者，我國乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)陽性率為約9.75％，現(xiàn)該癥患者約2000多萬。每年死于乙型肝炎相關(guān)疾病者約27萬多人(23/10萬)。因此，建立一種簡便、靈敏、重復性好的HBV檢測方法具有十分重要的意義。目前臨床上使用的檢測乙肝病毒復制的實驗室指標各有各的臨床意義，但是，他們或缺乏特異性，或較難在基層醫(yī)院中普及、推廣。目前廣泛使用的抗乙肝病毒藥物雖有一定的治療效果，但尚無有

2、效合理的評價治療效果的指標，無法確定停藥的時間，停藥后是否會復發(fā)(反彈)亦缺乏有效的預示指標。因此，臨床迫切需要能夠有效評估預示病毒復制以及從血清HBeAg陰性的乙肝病毒感染者中發(fā)現(xiàn)處于活動期的肝炎患者的實驗室檢測指標。 隨著分子生物學、免疫學和計算機等技術(shù)的迅速發(fā)展，新的實驗室檢測指標—乙型肝炎病毒外膜大蛋白(Hepatitis B Virus Large Surface Protein，LHBs)，已經(jīng)逐漸應用于實驗室診斷中

3、。但是目前尚無成熟的乙型肝炎病毒外膜大蛋白實驗室檢測應用于臨床，本實驗通過大量的臨床樣本驗證了乙型肝炎病毒外膜大蛋白在檢測各類乙肝患者病毒復制方面的特異性，旨在為我國日趨嚴峻的乙型肝炎防治工作的改善奠定理論和實驗基礎(chǔ)。 方法: 1、臨床標本采集：用無菌靜脈采血針采集患者的靜脈血； 2、首先通過檢測乙肝五項確定乙型肝炎患者； 3、通過PCR檢測上述患者血清中的病毒復制量； 4、通過ELLISA檢測上

4、述患者血清中乙肝病毒大蛋白(乙肝病毒大蛋白前S抗原或者乙肝病毒Dane顆?？乖?的陰陽性； 5、通過大量臨床樣本檢測結(jié)果評估乙肝病毒大蛋白(乙肝病毒大蛋白前S抗原或者乙肝病毒Dane顆?？乖?陰陽性與乙肝病毒PCR結(jié)果的一致性。 結(jié)果: 1、LHBs的蛋白水平與HBV DNA拷貝數(shù)對數(shù)值之間有良好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r=0.932。方差分析顯示不同HBV DNA拷貝數(shù)組別之間，LHBs含量呈顯著性差異； 2

5、、乙型肝炎大三陽患者中LHBs的陽性率與HBV DNA的陽性率經(jīng)X2檢驗沒有顯著性差異(P>0.05)； 3、乙型肝炎小三陽患者中HBV DNA的陽性檢出率為51.12％(181/354)；LHBs的陽性檢出率為55.65％(197/354)，二者差異無統(tǒng)計學意義(X2=0.81，P>0.05)； 4、本實驗分別用HBV DNA和LHBs兩個實驗室診斷指標對593份乙型肝炎患者(HBsAg陽性)血清進行測定，查X2界值表

6、得P<0.005。按a=0.05水準，可以認為兩種方法的檢測結(jié)果相同。 綜上所述，大蛋白的檢出結(jié)果與HBV DNA的檢出結(jié)果無明顯差異。HBV DNA拷貝數(shù)的對數(shù)值與LHBs表達具有相關(guān)性(r=0.932，P<0.001)，HBV DNA拷貝數(shù)的對數(shù)值變化可以用LHBs OD值為變量的線性回歸模型來解釋 結(jié)論: 1、LHBs能夠反應HBV的復制情況，血清中LHBs的含量與HBV DNA的拷貝數(shù)具有較好的相關(guān)性；