廣州市吸毒強(qiáng)戒人員HIV感染流行病學(xué)調(diào)查及基因型分析.pdf

1、研究背景和目的:
　　 HIV病毒已經(jīng)對全球人類的健康造成嚴(yán)重威脅，成為全球關(guān)注的熱點。HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原體，目前還沒有針對HIV-1的疫苗，早期診斷和制定預(yù)防措施是防止HIV-1傳播的關(guān)鍵。靜脈吸毒者是HIV高發(fā)人群，而且在吸毒者之間的流行和傳播比較嚴(yán)重，要想制定預(yù)防措施，了解其詳細(xì)的特征極其重要。因此本研究的目的是了解吸毒強(qiáng)戒人群中HIV的感染情況以及影響HIV感染的相關(guān)危險行為學(xué)特征，分析吸毒人群HIV感

2、染者中HIV-1的基因序列特征，確定其感染的基因亞型分布和各亞型的流行趨勢。
　　 研究方法:
　　 研究對象為2010年1月～2010年12月期間在戒毒管理局醫(yī)院接受治療的強(qiáng)制戒毒人員1085名，其中包括男性822例，女性263例，年齡從16歲至49歲。使用自行設(shè)計的調(diào)查問卷，對戒毒人員進(jìn)行一對一的問卷調(diào)查，內(nèi)容包括戒毒者的社會行為學(xué)特征，如姓名、年齡、職業(yè)、文化程度以及籍貫;吸毒方式、吸毒時間以及是否共用注射器等戒毒

3、人員的吸毒相關(guān)因素;同時調(diào)查性行為與HIV感染相關(guān)的影響因素，包括婚姻狀況、性伴侶人數(shù)和安全套使用情況。每例研究對象采集2ml靜脈血，加入EDTA-K2抗凝管中，按照衛(wèi)生部中國疾病預(yù)防控制中心2009年發(fā)布的《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》的有關(guān)要求檢測血漿中的HIV抗體，抗體初篩使用酶聯(lián)免疫吸附試驗方法，初篩陽性的送廣州市疾病預(yù)防控制中心，使用免疫印跡法進(jìn)行確認(rèn)實驗，若免疫印跡法確認(rèn)為陽性定義為HIV感染，最終結(jié)果使用SPSS13.0軟件，

4、分類資料使用行×列表卡方檢驗，等級資料用線性趨勢檢驗，陽性事件的影響因素分析采用Logistic回歸模型，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 從HIV確認(rèn)陽性的標(biāo)本中隨即抽取36例，從初篩陰性的樣本中抽取15例，共51份樣本，采集全血樣本2ml，加入EDTA-K2抗凝管中，使用德國凱杰試劑盒進(jìn)行基因組DNA的提取，用紫外分光光度計檢測核酸濃度和純度。在Genbank中查找HIVgag基因的序列，序列號為NC_001802，按

5、照引物設(shè)計的基本原則，使用軟件primerpremier5.0設(shè)計引物，并使用Oligo6.0進(jìn)行引物評估，在NCBI中進(jìn)行blast以驗證引物的特異性，設(shè)計的引物包括外引物和內(nèi)引物，其中外引物為引用文獻(xiàn)的引物，外引物的擴(kuò)增片段長度為1243bp，內(nèi)引物的擴(kuò)增片段長度為290bp，所有引物均在英濰捷基公司合成。使用外引物和內(nèi)引物進(jìn)行巢式PCR，PCR以后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，若有目的條帶，送去華大基因公司進(jìn)行測序，測序結(jié)果使用軟件Chro

6、mas2進(jìn)行分析，并通過美國拉莫斯國家實驗室HIV核酸數(shù)據(jù)庫的BLAST工具與國際參考毒株進(jìn)行比對，確認(rèn)所屬HIV的基因亞型。
　　 研究結(jié)果:
　　 在調(diào)查的1085名廣州市吸毒強(qiáng)戒人員(HIV確認(rèn)陽性107名，陽性率為9.86％);本調(diào)查中包括男822名，女263名，戶籍主要分布在廣東、廣西、湖南、湖北及四川省;年齡16～49歲，以20～30歲和30～40歲居多，分別占總?cè)藬?shù)的百分比為26.9％和46.4％，相應(yīng)地H

7、IV感染的陽性率也居多，30～40歲年齡組陽性率最高，為10.9％，進(jìn)行線性趨勢檢驗，吸毒者各年齡組與HIV感染率無顯著線性趨勢(x2＝2.040，P=0.154);男性的感染率為10.8％，女性的感染率為6.8％，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=3.560，P＝0.059)。學(xué)歷中以初中文化程度的人數(shù)最多，占72.4％，其次為高中、中專文化，占18.9％，不同文化程度HIV感染的陽性率不同，文化程度越低HIV感染的陽性率越高，對不同文化程度所

8、導(dǎo)致的感染率進(jìn)行了線性趨勢檢驗，結(jié)果表明HIV感染率與文化程度的下降呈線性相關(guān)(x2=13.85，P＜0.001)。
　　 在所調(diào)查的所有戒毒者中有88.1％以吸食海洛因為主，有1015名(占93.6％)吸毒者開始吸毒的方式為口服，隨著時間的延長，有706名(占65.1％)發(fā)展成為靜脈吸毒，其次是燙吸和口鼻吸，采用注射方式者H1V感染率為12.3％，燙吸組為6.0％，口鼻吸組為3.2％，三者之間有顯著性差異(x2=14.413，

9、P=0.001)。在靜脈吸毒者中有446名存在共用注射器行為，占63.2％，共用注射器者HIV感染率為13.0％，未共用注射器者為11.2％，兩者差異不顯著(x2=0.520，P=0.471)。首次吸毒的年齡多偏小，以21～30歲居多，吸毒的時間都比較長，以5～10年者最多，占34.8％，其次是2-5年，占25.4％，進(jìn)行線性趨勢檢驗，吸毒時間與HIV感染率呈線性相關(guān)，吸毒時間越長HIV的感染率越高(x2=17.51，P＜0.001)。

10、由此可見，吸毒人群的毒品濫用方式以及吸毒時間的長短都是HIV感染的重要影響因素。
　　 本次研究對象中有相對固定異性伴侶者(有配偶和異性同居)占42.6％，相應(yīng)的HIV感染陽性率低，不同婚姻狀況之間有顯著性差異(x2=9.339，P=0.025);按性伴侶數(shù)為無、1人、2～5人和5人以上分組，進(jìn)行線性趨勢檢驗，性伴侶人數(shù)的多少與HIV感染率存在線性關(guān)系(x2＝5.570，P=0.018)。在發(fā)生性行為時按每次都使用、偶爾使用、從

11、不使用安全套者以及無性行為進(jìn)行分組，每次都使用占43.7％，進(jìn)行線性趨勢檢驗，安全套使用情況與HIV陽性率有線性關(guān)系(x2=23.330，P＜0.001)。
　　 對于靜脈吸毒者，以HIV感染為因變量，以共用注射器等9個變量為自變量，進(jìn)行l(wèi)ogistic回歸全模型分析，發(fā)現(xiàn)共用注射器對靜脈吸毒的HIV感染無顯著性影響(β=0.165，P=0.550)。對于全部吸毒者，以HIV感染為因變量，以年齡、性別、文化程度、吸毒時間、吸毒方

12、式、婚姻狀況、性伴侶人數(shù)和安全套使用情況等8個變量為自變量，建立多因素logistic回歸分析，結(jié)果顯示，男性吸毒者HIV感染的風(fēng)險是女性的1.905倍(95％CI:1.09～3.327);文化程度越低，HIV感染的風(fēng)險越大，與大專及以上相比，小學(xué)、小學(xué)以下的風(fēng)險分別是9.655倍(95％CI:1.108～84.108)、11.942倍(95％CI:1.1～129.635)。吸毒時間越長，HIV感染的風(fēng)險越大，吸毒時間分別為2年～(OR

13、=5.317，95％CI:1.227～23.041)、5年～(OR=5.303,95％CI:1.236～22.754)、10年～(OR=5.969,95％CI:1.341～26.562)HIV感染的風(fēng)險均較吸毒時間小于1年的高。注射方式吸毒的HIV感染率風(fēng)險最高，口鼻吸最低。注射的風(fēng)險是口鼻吸的3.739倍(1.096～12.762)。對于安全套使用情況，不常使用安全套會增加HIV感染的風(fēng)險，相比于每次都使用，從來不使用的風(fēng)險是其4.1

14、67倍(95％CI:2.37～7.328)。
　　 36份標(biāo)本中，PCR共檢測出29例陽性樣本，29例PCR產(chǎn)物送去測序發(fā)現(xiàn)有27例測序成功，得到目的序列，有兩例測序失敗，通過序列比對，27例測序成功的樣本中，16例為CRF08-BC重組亞型，7例為CRF07-BC重組亞型，4例為CRF01-AE重組亞型，15例陰性對照均無目的條帶。
　　 結(jié)論:
　　 在吸毒人群中，男性比女性有更高的感染HIV風(fēng)險，文化程度、