Erbin在腸炎中的作用及其初步機制.pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎是一種非特異性炎癥性疾病，若得不到正確的醫(yī)治，長時間發(fā)展下去極易產(chǎn)生癌變；近年來在我國的發(fā)病率明顯提高，到目前為止，病因及發(fā)病機制仍不明確。本實驗旨在通過建立和應用各種小鼠腸炎模型，揭示Erbin在腸炎中的作用及其分子機制。這一研究將為預防和治療潰瘍性結(jié)腸炎提供新思路和理論基礎(chǔ)。
　　我們首先觀察了Erbin在腸組織中的表達情況；然后，我們利用葡聚糖硫酸鈉(DSS)化學誘導法成功構(gòu)建了小鼠潰瘍性結(jié)腸炎及修復模型，并結(jié)合

2、自發(fā)性慢性腸炎小鼠（IL-10基因敲除）模型，檢測Erbin的表達特點；同時，我們在潰瘍性結(jié)腸炎患者病變腸組織標本中檢測了Erbin的表達情況。
　　進一步，我們應用 DSS化學誘導法建立了Erbin C-端 PDZ結(jié)構(gòu)域突變小鼠（Erbin△c/△c小鼠）的潰瘍性結(jié)腸炎及修復模型，觀察Erbin在潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生及修復中的作用，并探討Erbin是否可能通過自噬途徑參與潰瘍性結(jié)腸炎的調(diào)控。
　　主要研究結(jié)果:
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3、1）X-gal染色結(jié)果顯示，Erbin在小鼠小腸和結(jié)直腸組織的粘膜上皮有較高的表達。
　　（2）以小鼠體重、分離出的結(jié)直腸形態(tài)、結(jié)直腸重量、長度及其組織病理學及5種炎癥因子（IL-1β，IL-6，IL-10，TNF-a，MCP-1）mRNA表達情況作為評價指標，發(fā)現(xiàn)DSS化學誘導法可成功建立小鼠潰瘍性結(jié)腸炎及修復模型；免疫印跡及免疫組化結(jié)果顯示，Erbin在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠急性階段結(jié)直腸組織中的表達較對照組低，在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠修

4、復階段的結(jié)直腸組織中表達較高。
　?。?）與對照組小鼠相比，Erbin C-端PDZ結(jié)構(gòu)域突變小鼠（Erbin△c/△c小鼠）潰瘍性結(jié)腸炎急性階段體重下降明顯、修復階段體重回升減緩；結(jié)直腸長度縮短、重量增加及長度與重量的比值增高；組織學上表現(xiàn)為腸道炎癥范圍更廣、隱窩損傷更嚴重；同時炎癥因子IL-10在潰瘍性結(jié)腸炎急性階段結(jié)直腸組織中表達很高。（4）免疫組織化學法檢測人臨床潰瘍性結(jié)腸炎標本發(fā)現(xiàn)，Erbin在潰瘍性結(jié)腸炎活動期腸組織中

5、的表達明顯下降。
　?。?）免疫熒光和免疫印跡方法顯示在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠急性階段結(jié)直腸組織中LC3蛋白的表達較對照組低，在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠修復階段結(jié)直腸中LC3蛋白的表達較高；未進行任何處理的Erbin△c/△c小鼠結(jié)直腸組織中LC3蛋白的表達較高于野生型（Erbin+/+）小鼠；無論是潰瘍性結(jié)腸炎急性階段還是修復階段，LC3在Erbin△c/△c小鼠結(jié)直腸組織中的表達均高于Erbin+/+小鼠。
　　結(jié)論：Erbin在腸組