毛冬青甲素對(duì)大鼠腦缺血再灌注后bFGF和GAP-43的表達(dá)及神經(jīng)元再生的影響.pdf

1、目的：探討毛冬青甲素(IlexoninA，IA)對(duì)大鼠腦缺血再灌注后bFGF和GAP-43的表達(dá)及神經(jīng)元再生的影響的可能作用機(jī)制。
　　 方法：線栓右側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)制成SD大鼠短暫局灶性腦缺血模型，實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成：正常組、假手術(shù)組、模型組、毛冬青甲素治療組(分IA20、40mg/kg二個(gè)亞組)等4大組。采用Longa等評(píng)分法進(jìn)行大鼠神經(jīng)功能評(píng)分；H

2、E染色觀察形態(tài)學(xué)變化；TTC染色法觀察腦缺血再灌注模型組和治療組缺血灶情況；免疫組織化學(xué)、蛋白免疫印跡法檢測(cè)缺血再灌注后不同時(shí)段各組缺血區(qū)周邊組織GAP-43、bFGF的表達(dá)情況；5-溴脫氧核苷尿嘧啶(Brdu)標(biāo)記法檢測(cè)新增殖細(xì)胞數(shù)量，用Brdu/NeuN雙染法標(biāo)記新生神經(jīng)元細(xì)胞，計(jì)算雙標(biāo)細(xì)胞陽(yáng)性率。并比較不同劑量(20、40mg/kg)的IA干預(yù)對(duì)大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分，缺血區(qū)周邊組織GAP-43、bFGF和新生神經(jīng)元表達(dá)的影響。

3、r>　　 結(jié)果：腦缺血再灌注后3d，模型大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分達(dá)到高峰(P＜0.05 VS14d、28d)；正常組及假手術(shù)組見散在的GAP-43陽(yáng)性細(xì)胞(以皮層為主)，模型組GAP-43陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量自再灌注7d后達(dá)到高峰，隨再灌注時(shí)間延長(zhǎng)其表達(dá)逐漸減少，至再灌注14d與正常組及假手術(shù)組比較仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；GAP-43蛋白于正常組及假手術(shù)組表達(dá)較少，模型組自再灌后第3d有一定量的表達(dá)，第7天表達(dá)最多，達(dá)到高峰，之后逐漸減少

4、，至28天仍有表達(dá)。同樣bFGF蛋白表達(dá)于再灌注后7d達(dá)到高峰，以后表達(dá)逐漸減少，與模型組其它時(shí)段比較P＜0.05。熒光雙標(biāo)顯示假手術(shù)組見散在的新生神經(jīng)元細(xì)胞；模型組自再灌注后第3d有少量Brdu、Brdu/NeuN表達(dá)，至第7d達(dá)到高峰，以后逐漸減弱，至28d仍有表達(dá)，較3d組水平略高；正常組沒有Brdu、Brdu/NeuN表達(dá)。經(jīng)不同劑量組IA20、40mg/kg干預(yù)后，熒光雙標(biāo)新生神經(jīng)元數(shù)量有不同程度的增加；大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分有

5、明顯下降；缺血周邊區(qū)GAP-43、bFGF蛋白表達(dá)有明顯增多，與模型組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)比較有顯著性差異(P＜0.05)。以40mg/kg作用為著。
　　 結(jié)論：
　　 1、腦缺血再灌注損傷可誘導(dǎo)GAP-43和內(nèi)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子bFGF的早期表達(dá)，并持續(xù)一段時(shí)間，我們推測(cè)GAP-43、bFGF的早期應(yīng)激表達(dá)與及時(shí)挽救缺血周邊組織神經(jīng)元的存活及促進(jìn)新生神經(jīng)元軸突再生和突觸重構(gòu)，進(jìn)而促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)有關(guān)。
　　 2、毛冬青甲