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文檔簡介
1、目的:妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)是產(chǎn)科常見病,其合并癥與并發(fā)癥多,嚴(yán)重危及母兒健康。胰島素抵抗(Insulin Resistance,IR)是妊娠期糖尿病與2型糖尿病共同的病理生理基礎(chǔ),胰島素抵抗依賴于TLR4和NF-кB的活化反應(yīng)。基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)LPS—TLR4—Nf-κB通路能介導(dǎo)大量釋放炎癥因子,是一個(gè)較為經(jīng)典的炎癥通路。本試驗(yàn)在體外用內(nèi)毒素刺激,建立這樣的炎癥通路,觀察
2、LPS—TLR4—Nf-κB通路在妊娠期糖尿病、正常孕婦以及育齡期婦女外周血單個(gè)核細(xì)胞中的作用,比較TLR4及NF-κB mRNA在三組中的表達(dá)是否有差異,以及三組單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)液中炎癥因子(IL-1、IL-10、TNF-a)的釋放水平,探討LPS—TLR4—Nf-κB通路介導(dǎo)的炎癥因子釋放在GDM發(fā)病中作用。
方法:實(shí)驗(yàn)研究對象的納入:新診斷妊娠期糖尿病孕婦(依據(jù)我國妊娠合并糖尿病臨床診斷與治療推薦指南)、正常孕婦以及育齡期
3、婦女各20例,存在胎膜早破、先兆早產(chǎn)以及合并其它潛在的炎癥者均不納入本次研究的范圍。體外模擬炎癥:抽取外周靜脈血5ml,分離出單個(gè)核細(xì)胞,用內(nèi)毒素(lipopolysaccharide,LPS)體外刺激并培養(yǎng)細(xì)胞觀察LPS—TLR4—Nf-κB通路在GDM患者主要環(huán)節(jié)標(biāo)志物表達(dá),RT-PCR(reverse transcription PCR)法檢測TLR4(toll like recepter4)及核因子κB(Nf-κB)mRNA的表
4、達(dá)。炎癥因子的測定:ELISA法檢測培養(yǎng)液中IL-1、IL-10、TNF-a水平。
結(jié)果:GDM組與正常孕婦組及育齡期婦女組TLR4、Nf-κB mRNA表達(dá)存在差異(p=0.000),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GDM組及正常孕婦組TLR4與Nf-κB mRNA表達(dá)水平存在相關(guān)性(rGDM=0.768,r正常孕婦=0.833),且相關(guān)性良好。育齡期婦女組TLR4與Nf-κB mRNA表達(dá)水平也存在相關(guān)性(r育齡期婦女=0.719),相
5、關(guān)性稍差。GDM組IL-1、IL-10以及TNF-α表達(dá)水平分別為:66.15±1.66、43.32±0.87及4.71±0.27,正常孕婦組IL-1、IL-10以及TNF-α表達(dá)水平分別為:14.88±0.80、12.49±0.28及0.89±0.39,正常育齡期婦女組IL-1、IL-10以及TNF-α表達(dá)水平分別為3.58±0.22、P25=0.90;P75=1.79及0.26±0.02。
結(jié)論:GDM患者外周血單個(gè)核細(xì)胞
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