2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、蜱是一類以吸血為生的節(jié)肢動物,是人和動物的許多病原的傳播媒介,包括細菌、真菌、病毒、立克次體、螺旋體和寄生原蟲等多種病原。在中國,已記錄的蜱類近120種,其中10余種具有明顯的醫(yī)學重要性,了解病原在蜱體的傳播機制,特別是病原體與蜱的相互作用關系,對于蜱和蜱傳病的防治具有重要價值??刮⑸锒嚯淖鳛轵绲南忍煨悦庖咝钟柚?,是研究蜱與病原體的相互作用的重要切入點。 木實驗以鐮形扇頭蜱吸血前后雄蜱唾液腺的抑制消減雜交cDNA文庫中的

2、EST數(shù)據(jù)為基礎,從鐮形扇頭蜱體內(nèi)克隆出M200和M50二個新基因。M200基因全長542bp,編碼100個氨基酸,預測分了量為9.85kDa,,含有典型的信號肽序列,經(jīng)同源性比較,該基因編碼蛋白與與微小牛蜱抗微生物多肽分子Ixodidin序列的顯著同源。M50基因全長410bp,編碼100個氨基酸,預測分子量為9.0kDa,含有典型的信號肽序列,無顯著性同源分子,僅與單一異尖線蟲蛋白酶抑制因子有低度同源。結(jié)構(gòu)上,M200和M50預測蛋

3、白都含有半胱氨酸的抗微生物多肽的典型特征,即在C-末端含有6個保守的半胱氨酸殘基(C…CXXXC…C…CXC),形成一個稱為CS αβ(cysteine-stabilized αβ)穩(wěn)定的基序(motif)。綜合同源性、結(jié)構(gòu)特征、分子量、信號肽等生物信息學分析結(jié)果,初步預測M200和M50為二個編碼鐮形扇頭蜱抗微生物多肽的新基因。 應用RT-PCR方法分析了M200和M50基因在蜱的不同組織器官和不同發(fā)育階段的表達情況。結(jié)果表明

4、,這二個基因的表達沒有組織特異性;M200在蜱的各個發(fā)育階段卵、幼蜱、若蜱和成蜱均有表達,但M50在蜱的卵、若蜱階段沒有表達。 應用RT-PCR方法分析了M200和M50基因在蜱的吸血前后的表達模式。M200和M50基因在蜱吸血后的轉(zhuǎn)錄量顯著高于未吸血蜱,說明這兩個基因的表達與吸血有關。 成功構(gòu)建了重組表達載體pGEX-4T-1/M200和pGEX-4T-1/M50,并轉(zhuǎn)化到表達苗BL21中,經(jīng)IPTG誘導,結(jié)果表明M2

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