鐮形扇頭蜱IgG結(jié)合蛋白基因的克隆及表達(dá).pdf

1、蜱是一類專性吸血的體外寄生蟲，分布廣泛，是許多人和動物重要疾病的傳播媒介，經(jīng)蜱傳播的病原體有細(xì)菌、病毒、真菌、立克次體、螺旋體以及原蟲，不僅給畜牧業(yè)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)還影響人類健康。目前世界上約有820多種蜱，我國發(fā)現(xiàn)的蜱有110多種，鐮形扇頭蜱是我國南方的優(yōu)勢蜱種，主要傳播牛巴貝斯蟲病、馬巴貝斯蟲病和吉氏巴貝斯蟲病。蜱及蜱傳播疾病引起的經(jīng)濟(jì)損失十分巨大，到目前為止，免疫防治被認(rèn)為是最有潛力的防治策略，而尋找敏感、長效、安全的抗原

2、基因是免疫防治的前提條件。IgG結(jié)合蛋白(IgG binding protein,IGBP)是蜱體內(nèi)的一種重要蛋白質(zhì)，主要存在于蜱的血淋巴和唾液腺中，可以結(jié)合進(jìn)入蜱血淋巴中的宿主免疫球蛋白，避免了宿主免疫球蛋白對蜱內(nèi)部囂官的損害，有些種類的IGBP具有雄性特異性，是雄蜱協(xié)助雌蜱順利完成吸血所必不可少的，IGBP是蜱體內(nèi)一種具有疫苗潛力的功能分子。 本實(shí)驗(yàn)以鐮形扇頭蜱吸血前后雄蜱唾液腺的抑制消減雜交cDNA文庫中的EST數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)

3、，應(yīng)用RACE方法從鐮形扇頭蜱體內(nèi)克隆出一個(gè)IGBP基因的全長序列，該基因全長683bp，編碼178個(gè)氨基酸，預(yù)測分子量為19.5kDa，經(jīng)同源性比較該基因與具尾扇頭蜱的IGBP-MB基因序列的同源性高達(dá)92％。用RT-PCR方法分析了該基因表達(dá)的性別特異性、各個(gè)器官、各個(gè)發(fā)育階段的表達(dá)情況，結(jié)果表明，該基因表達(dá)沒有性別特異性；IGBP基因在唾液腺、殼這兩個(gè)器官有所表達(dá)，但在腸中卻沒有表達(dá)；在蜱的各個(gè)發(fā)育階段均有表達(dá)。成功構(gòu)建了重組表達(dá)