RNA干擾CCR3基因與糖皮質(zhì)激素對(duì)變應(yīng)性鼻炎小鼠模型嗜酸性粒細(xì)胞影響的研究.pdf

1、目的：
　　觀察在變應(yīng)性鼻炎小鼠給予RNA干擾CCR3基因的慢病毒處理后小鼠模型中CD34+細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞變化情況，并通過(guò)與糖皮質(zhì)激素對(duì)照組的比較，闡述變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病機(jī)理并尋找較臨床激素治療更加安全有效的可能方式。
　　方法：
　　將已驗(yàn)證具有高效特異性、專一性的慢病毒CCR3shRNA（rLV-mCCR3-3）作用于變應(yīng)性鼻炎小鼠，收集經(jīng)慢病毒CCR3shRNA處理后小鼠的骨髓、血液、鼻黏膜。鼻黏膜 HE染色并

2、通過(guò)免疫組化方法檢測(cè) CD34+細(xì)胞的浸潤(rùn)情況。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RT-PCR檢測(cè)小鼠骨髓、血液及鼻粘膜中嗜酸性粒細(xì)胞CCR3及其陽(yáng)性離子mRNA的表達(dá)及改變。
　　結(jié)果：
　　1、小鼠鼻粘膜上CD34+細(xì)胞浸潤(rùn)情況有差異，CCR3shRNA處理組、激素對(duì)照組、與正常對(duì)照組中上 CD34+細(xì)胞數(shù)可見(jiàn)明顯少于 PBS組和ShRNA組（P<0.05），具有統(tǒng)計(jì)數(shù)意義，正常對(duì)照組中CD34+細(xì)胞少于CCR3shRNA處理組、激素對(duì)照組

3、。CCR3shRNA處理組中的CD34+細(xì)胞稍低于激素對(duì)照組之間，但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2、在RT-PCR檢測(cè)小鼠骨髓、血液及鼻粘膜中嗜酸性粒細(xì)胞CCR3及其陽(yáng)性離子mRNA的表達(dá)結(jié)果中，CCR3shRNA處理組中的嗜酸性細(xì)胞的CCR3及多種陽(yáng)離子蛋白（主要堿性蛋白(MBP)、陽(yáng)離子蛋白(ECP)、過(guò)氧化物酶(EPO)）在3種組織中的表達(dá)量都明顯ShRNA組及PBS對(duì)照（P<0.05），CCR3shRNA處理組

4、mRNA表達(dá)量低于激素組，但都無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　本實(shí)驗(yàn)通過(guò)特異性高、專一性的基因沉默CCR3有效的降低小鼠變應(yīng)性鼻炎中嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，進(jìn)一步證實(shí)了CCR3信號(hào)通路在變應(yīng)性鼻炎中致病機(jī)制發(fā)揮重要作用，能夠有力的抑制EOS遷移及浸潤(rùn)，達(dá)到減少EOS分泌脫顆粒，從而減輕炎癥程度，改善變應(yīng)性鼻炎癥狀，甚至可能治愈鼻炎。目前沉默CCR3與糖皮質(zhì)激素都能在一定程度上抑制嗜酸性粒細(xì)胞的表達(dá)，沉默CCR3可能