HnRNP A1、CYP2A6及肝癌相關(guān)性的體外研究.pdf

1、背景：CYP2A6是藥物代謝酶P450家族中的重要成員，約有3％的藥物以及外源性物質(zhì)經(jīng)過其代謝，同時(shí)它的活性能夠被許多內(nèi)源性和外源性物質(zhì)誘導(dǎo)。HnRNPA1作為核不均一核糖核蛋白家族的重要成員之一，對(duì)于部分mRNA的轉(zhuǎn)錄后水平有重要的調(diào)節(jié)作用。目前有研究報(bào)道hnRNPA1蛋白能夠與CYP2A6 mRNA序列中的特殊區(qū)域結(jié)合，從而影響mRNA的表達(dá)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，在多種腫瘤組織中，hnRNPA1以及CYP2A6的表達(dá)都是明顯增高的。

2、 目的：本研究的目的在于探尋hnRNP A1，CYP2A6以及肝癌疾病三者之間是否存在某種潛在聯(lián)系，并且比較在肝癌組織與正常肝臟組織中hnRNP A1和CYP2A6的表達(dá)是否存在差異。最后驗(yàn)證hnRNP A1蛋白對(duì)CYP2A6的表達(dá)所產(chǎn)生的影響程度。 方法：在本研究中，我們收集了22例肝臟組織，其中包括11例肝癌組織和11例正常對(duì)照組織標(biāo)本。采用realtime PCR的方法定量mRNA水平，western blottin

3、g的方法來定量蛋白水平。通過RNA干擾技術(shù)沉沒掉hepG2細(xì)胞中的hnRNPA1基因，再分別測(cè)定hnRNPA1及CYP2A6蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：通過比較癌癥組與對(duì)照組之間hnRNP A1以及CYP2A6的mRNA水平，發(fā)現(xiàn)在癌癥組中兩者的表達(dá)都明顯增高，其中hnRNP A1的表達(dá)P=0.002，CYP2A6的表達(dá)P=0.004。在蛋白表達(dá)水平上也出現(xiàn)了同樣的現(xiàn)象，兩種蛋白的表達(dá)在癌癥組織中也同樣增高(hnRNPA1的表達(dá)P=0

4、.003，CYP2A6表達(dá)P=0.002)。 相關(guān)性分析顯示，在肝癌組中，hnRNPA1與CYP2A6在mRNA(P=0.013)以及蛋白水平(P=0.006)均存在顯著的潛在相關(guān)性，并且hnRNPA1蛋白的表達(dá)以及CYP2A6 mRNA的表達(dá)水平之間也潛在相關(guān)。 RNA干擾的結(jié)果表明在hepG2細(xì)胞中，當(dāng)hnRNP A1基因被沉沒后，CYP2A6的蛋白表達(dá)水平有一定程度的下降但是沒有達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：與對(duì)