阿侖磷酸鈉對(duì)共育體系中成骨-破骨細(xì)胞生物特性的影響.pdf

1、目的：①觀察阿侖磷酸鈉對(duì)人成骨細(xì)胞增殖和核因子κβ受體活化因子配體（RANKL）及護(hù)骨素（OPG）mRNA表達(dá)的影響。②觀察阿侖磷酸鈉對(duì)共育體系中成骨-破骨細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。 材料：手術(shù)中取得的松質(zhì)骨骨塊，阿侖磷酸鈉（杭州默沙東制藥有限公司，批號(hào)06130），Ⅱ型膠原酶、胰蛋白酶（Invitrog），胎牛血清（cell science） 方法：①在含不同濃度的阿侖磷酸鈉（10-9～10-4mol/L）培養(yǎng)液中培養(yǎng)成骨

2、細(xì)胞。②阿侖磷酸鈉（10-8mol/L）加入共育體系中，檢測(cè)對(duì)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的影響。③成骨細(xì)胞觀察。④以MTT檢測(cè)阿侖磷酸鈉對(duì)成骨細(xì)胞的增殖的影響。⑤以半定量RT-PCR方法觀察不同濃度阿侖磷酸鈉（10-9～10-5 mol/L）對(duì)成骨細(xì)胞表達(dá)OPG/RANKL mRNA的影響。⑥觀察阿侖磷酸鈉對(duì)破骨細(xì)胞的影響。 結(jié)果：①10-5、10-4mol/L的阿侖磷酸鈉抑制成骨細(xì)胞增殖，10-9～10-6mol/L的阿侖磷酸鈉促進(jìn)成

3、骨細(xì)胞增殖，其中10-8mol/L的阿侖磷酸鈉對(duì)成骨細(xì)胞的增殖作用最強(qiáng)。阿侖磷酸鈉呈濃度依賴性降低RANKL mRNA表達(dá)，干預(yù)72h，10-5mol/L抑制作用最大（P<0.01）。阿侖磷酸鈉呈濃度依賴性增加OPG mRNA表達(dá)，干預(yù)72h，10-6mol/L增加作用最明顯（P<0.01），而10-5mol/L時(shí)又減低。②阿侖磷酸鈉促進(jìn)共育體系中成骨細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)其ALP活性，減弱破骨細(xì)胞TRAP活性，減少破骨細(xì)胞骨吸收陷窩數(shù)。