橄欖苦苷對破骨細(xì)胞分化以及骨吸收功能的影響.pdf

1、骨質(zhì)疏松、腫瘤骨轉(zhuǎn)移、人工關(guān)節(jié)假體的無菌性松動等疾病是常見的骨破壞相關(guān)疾病。在人體內(nèi)破骨細(xì)胞是唯一具有骨吸收功能的細(xì)胞，所以靶向性抑制破骨細(xì)胞的分化形成是預(yù)防和治療這類疾病最重要的方向。然而對于治療這類疾病的手段和藥物，目前可供種類比較缺乏，副作用也比較明顯。由此可見，開發(fā)對破骨細(xì)胞具有靶向性和對人體副作用更輕微的治療藥物迫在眉睫。天然植物化學(xué)提取物具有相對有效、副作用小的功效，為治療骨破壞相關(guān)疾病提供了創(chuàng)新的思路。橄欖苦苷(oleur

2、opein，Ole)是橄欖油提取物中一種主要的酚類化合物，具有多用途的藥理作用,如治療動脈粥樣硬化、抗氧化、抗炎等作用。研究報(bào)道橄欖苦苷能夠促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化成骨分化，但抑制成脂分化，可是在但橄欖苦苷對破骨細(xì)胞的影響及分子機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)主要研究橄欖苦苷對破骨細(xì)胞分化、骨吸收功能及相關(guān)信號通路的影響。本實(shí)驗(yàn)采取了抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP)染色、凋亡實(shí)驗(yàn)

3、、骨片實(shí)驗(yàn)、Western blot等研究方法。把不同濃度的橄欖苦苷（12.5、25、50μmol/L）分別加入由核因子κB受體活化因子配體(receptoractivator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL)誘導(dǎo)的體外破骨細(xì)胞培養(yǎng)體系中，用TRAP染色方法觀察呈TRAP陽性的多核細(xì)胞；RAW264.7細(xì)胞也用RANKL誘導(dǎo)，用流式細(xì)胞儀分析橄欖苦苷對破骨細(xì)胞凋亡的影響；在掃描電鏡（scan

4、ning electron microscope，SEM）下觀察骨吸收陷窩，并用圖像分析軟件統(tǒng)計(jì)其面積。采用Western blot法檢測橄欖苦苷對破骨細(xì)胞特異性蛋白組織蛋白酶 K(cathepsin K，CTSK)、激活 T細(xì)胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells1，NFATC1)及相關(guān)信號通路蛋白表達(dá)的影響。TRAP染色結(jié)果顯示，橄欖苦苷能顯著抑制RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞的形成，且呈濃度依