養(yǎng)精膠囊提取液對GC-1精原干細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究.pdf

1、[目的]觀察養(yǎng)精膠囊提取液對GC-1細(xì)胞增殖的影響，并探討其具體的作用機(jī)制。
　　[方法]以體外小鼠精原細(xì)胞系GC-1細(xì)胞培養(yǎng)為模型，用無血清培養(yǎng)液誘導(dǎo)GC-1細(xì)胞凋亡，繼而加入養(yǎng)精膠囊提取液（0.01～1 mg/mL）作用后，用MTT法檢測細(xì)胞的活性;用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期;實(shí)時熒光定量PCR法和Western blot法檢測OCT4和PLZF的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá);利用GFRa1 siRNA和LY294002探究其作用機(jī)制

2、;通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡;實(shí)時熒光定量PCR法和Western blot法檢測caspase-3的表達(dá)。
　　[結(jié)果]養(yǎng)精膠囊提取液加入GC-1細(xì)胞后，能夠顯著增加細(xì)胞的活力;能降低G0/G1期細(xì)胞比例，增加S期細(xì)胞比例;OCT4和PLZF的mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平增加;使用GFRa1 siRNA和LY294002處理后，明顯抑制了養(yǎng)精膠囊提取液對GC-1細(xì)胞的增殖，降低了養(yǎng)精膠囊提取液對OCT4和PLZF的mRNA和蛋白質(zhì)