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文檔簡(jiǎn)介
1、己烯雌酚和雙烯雌酚是結(jié)構(gòu)相近的人工合成的非甾體雌酚類激素,臨床上用于補(bǔ)充體內(nèi)雌激素不足,治療乳腺癌、前列腺癌、閉經(jīng)和絕經(jīng)期綜合癥等,并能夠促使女性器官及副性征正常發(fā)育,促使子宮內(nèi)膜增生,增強(qiáng)子宮收縮,提高子宮催產(chǎn)素的敏感性;小劑量刺激垂體前葉促性激素及催乳素的分泌,大劑量則起到抑制作用。雙烯雌酚是己烯雌酚的體內(nèi)代謝產(chǎn)物。在畜牧業(yè)中,己烯雌酚和雙烯雌酚主要用于牛奶產(chǎn)量、促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,具有增加蛋白質(zhì)沉積和減少脂肪沉積的作用。長(zhǎng)期使用己烯雌
2、酚和雙烯雌酚或食用含有己烯雌酚和雙烯雌酚的奶制品或肉制品會(huì)導(dǎo)致婦女更年期紊亂、生育能力下降、女性性早熟、男性女性化,并能導(dǎo)致女性產(chǎn)生乳腺癌、子宮癌等。因此建立方便、快捷的己烯雌酚和雙烯雌酚檢測(cè)方法具有重要意義。
在堿性介質(zhì)中,Ag(Ⅲ)配合物氧化魯米諾產(chǎn)生穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號(hào),某些物質(zhì)能顯著增強(qiáng)或抑制魯米諾-Ag(Ⅲ)體系的化學(xué)發(fā)光,并且發(fā)光強(qiáng)度與物質(zhì)濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。本試驗(yàn)將Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系
3、與流動(dòng)注射技術(shù)相結(jié)合,建立了檢測(cè)己烯雌酚的新方法,并將此方法應(yīng)用于己烯雌酚片劑的含量測(cè)定。
毛細(xì)管電泳將電泳技術(shù)與現(xiàn)代微柱分離技術(shù)相結(jié)合,以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,在毛細(xì)管中按各組分的淌度和分配行為的不同進(jìn)行高效、快速的分離。毛細(xì)管電泳的分離通道為中空的毛細(xì)管,對(duì)樣品的預(yù)處理要求較低,本研究旨在建立毛細(xì)管電泳法測(cè)定育發(fā)產(chǎn)品中己烯雌酚和雙烯雌酚。
一、流動(dòng)注射-Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系測(cè)定己烯雌酚片劑中己
4、烯雌酚含量
目的:建立流動(dòng)注射-Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系測(cè)定己烯雌酚片劑中己烯雌酚含量的新方法。
方法:在堿性條件下,魯米諾被Ag(Ⅲ)氧化產(chǎn)生穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號(hào),己烯雌酚能顯著抑制Ag(Ⅲ)-魯米諾體系的化學(xué)發(fā)光作用,且發(fā)光強(qiáng)度與樣品的濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。通過(guò)對(duì)魯米諾溶液濃度、堿度和Ag(Ⅲ)溶液濃度、堿度等一系列發(fā)光條件進(jìn)行優(yōu)化選取,在最佳發(fā)光條件下繪制己烯雌酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對(duì)樣品進(jìn)
5、行含量測(cè)定。
結(jié)果:流動(dòng)注射-化學(xué)發(fā)光法測(cè)定己烯雌酚的最低檢出限為3.0×10-7mol/L。線性范圍為5.0×10-7-5.0×10mol/L,回歸方程為△I=5.84×108C+548,線性相關(guān)系數(shù)r=0.9989。對(duì)1.0×10-5mol/L的己烯雌酚連續(xù)進(jìn)行平行測(cè)定7次,RSD為3.4%,加標(biāo)回收率在88.6%-100.0%之間,RSD為3.7%。
結(jié)論:流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法測(cè)定己烯雌酚片劑中己烯雌酚含
6、量,方法簡(jiǎn)便快捷、準(zhǔn)確可靠,可用于己烯雌酚片劑生產(chǎn)過(guò)程己烯雌酚的質(zhì)量控制。
二、毛細(xì)管電泳法測(cè)定育發(fā)產(chǎn)品中的己烯雌酚和雙烯雌酚
目的:建立毛細(xì)管電泳-紫外檢測(cè)法測(cè)定育發(fā)產(chǎn)品己烯雌酚和雙烯雌酚含量的新方法。
方法:采用未涂層彈性熔融石英毛細(xì)管(75μmi.d.×55 cm,有效長(zhǎng)度50cm)為分離通道,20mmol/L硼砂(含體積分?jǐn)?shù)為30%的N,N-二甲基甲酰胺)為運(yùn)行緩沖液,采用重力進(jìn)樣,進(jìn)樣
7、時(shí)間10s,分離電壓為20kv,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。
結(jié)果:己烯雌酚和雙烯雌酚在9min內(nèi)達(dá)到基線分離,在2.0×10-6-2.0×10-4mol/L,2.0×10-6-2.0×10-4mol/L濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9991、0.9994,檢出限為6.7×10-7mol/L和3.3×10-7mol/L,回收率分別在89.6-94.6%和88.7-104.8%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.97%和
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