兒童流感的臨床特征分析及Toll樣受體3基因多態(tài)性與兒童流感遺傳易感性、病情嚴(yán)重性的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：
　　流行性感冒(簡稱流感)是由流感病毒引起的一種急性上呼吸道傳染病，從1918年西班牙流感直至2009年甲型H1N1流感，引起了全世界的廣泛關(guān)注，據(jù)WHO報道，全世界每年的重癥流感病例有3~5百萬，其中死亡人數(shù)為25~50萬，而其中，5歲及以下的兒童對疾病的耐受力低下，是重癥流感的高風(fēng)險人群之一。世界銀行估計，2009年H1N1流感大流行造成了3萬億美元的經(jīng)濟損失。基于流感對廣大兒童的健康和生命安全造成的威脅，以及對社

2、會造成的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)和損失，因此，積極探討兒童流感的遺傳易感因素，對流感的易感人群進行早期預(yù)防、防止流感的發(fā)生和進一步發(fā)展為重癥流感、個體化治療以及預(yù)后評估，對于降低流感的發(fā)病率和死亡率以及減輕社會經(jīng)濟負(fù)擔(dān)具有重要意義。Toll樣受體3(Toll-like receptor3,TLR3)是先天性免疫和固有免疫中重要的識別受體，廣泛分布于樹突狀細(xì)胞(DC)，表達于細(xì)胞質(zhì)膜的表面和胞內(nèi)溶酶體中，可識別病毒核酸及內(nèi)吞體內(nèi)的核酸，研究認(rèn)為，TLR3

3、信號通路的過度活化和調(diào)節(jié)失常與流感的發(fā)病有關(guān)，通過影響 TLR3信號通路而調(diào)控炎癥級聯(lián)反應(yīng)以及抗病毒免疫反應(yīng)，TLR3的表達異?；蚪Y(jié)構(gòu)功能異常可能影響流感病毒的識別和信號的進一步傳遞，從而引起異常的免疫應(yīng)答。目前已有研究表明TLR3 rs5743313 C/T和TLR3 rs5743315 A/C多態(tài)性引起的氨基酸改變可導(dǎo)致TLR3受體胞外域發(fā)生改變，影響 Toll樣受體信號傳導(dǎo)和炎癥介質(zhì)的生成，可能使機體更易感染流感病毒。Esposi

4、to等研究發(fā)現(xiàn)TLR3 rs5743313C/T多態(tài)性與流感肺炎相關(guān)， TLR3 rs5743315A/C多態(tài)性可能在流感導(dǎo)致的肺炎中起到重要作用。Hidaka等在1例流感相關(guān)性腦病的患者中發(fā)現(xiàn)TLR3（F303S）的錯義突變，表明TLR3基因（F303S）的突變可能與重癥流感并發(fā)癥相關(guān)。雖然上述研究表明，TLR3基因多態(tài)性與流感易感性和病情嚴(yán)重性存在關(guān)聯(lián)，但目前國內(nèi)尚無相關(guān)的研究。本課題即從單核苷酸多態(tài)性的角度，通過檢測和分析流感患兒

5、TLR3基因多態(tài)性，探討TLR3基因多態(tài)性與兒童流感的遺傳易感性、病情嚴(yán)重性的關(guān)系。
　　研究目的：
　　1．分析2013年3月至2013年5月期間在廣州市婦女兒童醫(yī)療中心住院治療的86例流感患兒的臨床特征；
　　2．檢測以上流感患兒的TLR3基因多態(tài)性，初步探討TLR3基因多態(tài)性與兒童流感遺傳易感性、病情嚴(yán)重性的關(guān)系。
　　方法：
　　收集2013年3月至2013年5月收治于廣州市婦女兒童醫(yī)療中心確診的8

6、6例甲型或乙型流感患兒的病歷資料，總結(jié)分析其臨床特點。用基因測序的方法對上述86例流感患兒的TLR3基因進行多態(tài)性檢測和分析，并將檢測到的多態(tài)性位點與千人基因組項目數(shù)據(jù)庫中的197名中國漢族人群進行對照，采用基因計數(shù)法計算各組等位基因頻率和基因型頻率，χ2檢驗分析中國漢族人群、輕癥組、重癥組間等位基因頻率和基因型頻率的分布差異；計算OR值及其95％CI以評估等位基因及各基因型的風(fēng)險。采用t檢驗進行各組間的數(shù)據(jù)比較，P<0.05為差異有統(tǒng)

7、計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1．86例流感患兒中，輕癥組43例，重癥組43例，輕癥組平均年齡4.58±2.69歲，重癥組平均年齡2.43±1.83歲(P<0.05)，住院時間輕癥組為5.05±2.50天，顯著短于重癥組的13.86±11.25天(P<0.05)，重癥組有16例患兒住院期間入住PICU的時間為9.67±7.89天。對重癥組在入院24小時內(nèi)進行PRISMⅢ評分為5.21±3.95,16例危重流感患兒入PICU24

8、小時內(nèi)進行PRISMⅢ評分為9.44±3.29；重癥組入院24小時內(nèi)PaO2/FiO2分別為261.16±76.95，16例危重流感患兒入PICU24小時內(nèi)的PaO2/FiO2結(jié)果為191.69±66.9；胸部影像學(xué)表現(xiàn)為雙肺滲出或浸潤影在重癥組占58.1%；在43例重癥組患兒中，15例發(fā)生呼吸衰竭(34.9%)，進行機械通氣的時間為6.15±4.81天；在43例重癥組患兒中肝功能障礙的發(fā)生率為16.3%；神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙的發(fā)生率為16

9、.3%；2例患兒發(fā)生凝血系統(tǒng)功能障礙，2例發(fā)生循環(huán)系統(tǒng)功能障礙，2例死亡。
　　2．TLR3基因SNPs在中國漢族人群與歐洲人群、中國漢族人群與非洲人群間比較，各組間、各SNPs的等位基因頻率及基因型頻率均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　3．TLR3基因rs1879026的等位基因G和T的頻率在中國漢族人群中分別為79.4%和20.6%,病例組分別為75.0%和25.0%，病例組等位基因T的頻率明顯高于中國漢族人群，兩

10、組相比具有顯著性差異(P=0.039<0.05)，OR值為1.539，95%CI=[1.020-2.323]。rs1879026無論等位基因頻率和基因型頻率在輕癥組與重癥組間比較均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
　　4．TLR3基因rs5743312、rs5743313、rs5743314的SNPs無論等位基因頻率和基因型頻率在病例組與中國漢族人群、輕癥組與重癥組間比較均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
　　5．研究發(fā)現(xiàn)TLR

11、3基因存在1個由3個SNPs(rs1879026 rs5743313、rs5743314)組成的單倍域，共存在4個單倍型即GCG、TCG、GTC、GTG，以上4個單倍型在病例組和中國漢族人群、輕癥組和重癥組之間比較，均無顯著的統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
　　6．對病例組、中國漢族人群分別進行Hardy-Weinberg平衡吻合度檢驗，結(jié)果顯示兩組的SNPs基因型期望值和觀察值吻合較好，具有很好的群體代表性。
　　結(jié)論：

12、r>　　1．相對于輕癥流感患兒，重癥流感患兒以3歲以下嬰幼兒為主；早期的PaO2／FiO2、影像學(xué)檢查、PRISMⅢ評分及臟器功能障礙評估有助于對流感患兒病情危重程度盡早作出正確判斷。
　　2．TLR3基因rs1879026T等位基因與兒童流感的易感性相關(guān)，但與兒童流感的病情嚴(yán)重性無明顯的相關(guān)性。
　　3．TLR3基因rs5743312、rs5743313、rs5743314的多態(tài)性與兒童流感的易感性和病情嚴(yán)重性均無明顯的相