Survivin表達(dá)對(duì)鼻咽癌放射存活細(xì)胞放射抗拒的影響及姜黃素的放射增敏.pdf

1、廣東醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文Survivin表達(dá)對(duì)鼻咽癌放射存活細(xì)胞放射抗拒的影響及姜黃素的放射增敏姓名：畢宏申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：孫寧20070501Survivin表達(dá)對(duì)鼻咽癌放射存活細(xì)胞放射抗拒的影響及姜黃素的放射增敏摘要【目的】鼻咽癌放療后的存活細(xì)胞放射抗性增加，是引起鼻咽癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)Sutvivin是新近發(fā)現(xiàn)的放射抗拒相關(guān)基因。本實(shí)驗(yàn)探討Survivin表達(dá)對(duì)鼻咽癌發(fā)生發(fā)展及放療后復(fù)發(fā)的影響；觀察

2、鼻咽癌細(xì)胞的自發(fā)性凋亡及放射誘導(dǎo)凋亡、Survivin表達(dá)及其與放射敏感性的關(guān)系；探討姜黃素及分次放療聯(lián)合姜黃素對(duì)放射抗拒細(xì)胞的Survivin表達(dá)及對(duì)其放射敏感性的影響，尋找以Survivin為靶點(diǎn)的放射增敏方法【方法】采用免疫組化sP法檢測(cè)3l例放療后復(fù)發(fā)鼻咽癌、30例鼻咽非角化型鱗癌、30例鼻咽粘膜慢性炎中Survivin、Caspase3的表達(dá)對(duì)CNE2Z放射后存活細(xì)胞Trl2給予單次劑量為6Coy的照射，獲得再放射后存活細(xì)胞R

3、18。對(duì)Ct恨2Z、Trl2及RIB細(xì)胞采用MTT法繪制生長(zhǎng)曲線；平板克隆形成實(shí)驗(yàn)繪制細(xì)胞放射存活曲線。流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33342／PI雙熒光活染法檢測(cè)CNE2Z和R18的自發(fā)性凋亡及放射誘導(dǎo)凋亡的情況：RTPCR檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)和不同劑量射線處理后的CNB2Z和RIB的survivinmRNA的表達(dá)；比色法檢測(cè)Caspase3活性。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)不同濃度姜黃素對(duì)Trl2細(xì)胞Suxvivin表達(dá)的影響，平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)低濃

4、度姜黃素對(duì)Trl2細(xì)胞的放射增敏作用。對(duì)低濃度姜黃素與分次放療處理過的RIB細(xì)胞，用RTPCR檢測(cè)survivinmRNA的表達(dá)；比色法檢測(cè)其Caspase3活性。【結(jié)果】(1)Survivin、Caspase3表達(dá)的陽性率，鼻咽粘膜慢性炎分別為2333％(7／30)和9667％(29，30)，在鼻咽非角化型鱗癌中分別為7333％(22／30)和1667％(5／30)，在放療后復(fù)發(fā)鼻咽癌分別為8387％(26，31)，2258／0(7，