特應(yīng)性皮炎外周血細胞FOXP3+表達及血清IL-10,TGF-β相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　本實驗意在通過檢測外周血細胞Foxp3mRNA的表達水平探索AD患者外周血CD4+CD25+Tr的情況，并通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測外周血清中TGF-β（轉(zhuǎn)移生長因子β）及IL-10（白介素-10）的表達水平來討論其對AD（特應(yīng)性皮炎）的發(fā)病過程起到的作用，為探索其發(fā)病機制及治療方向提供參考。
　　實驗方法：
　　提取AD組和正常對照組人群的總RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA后，經(jīng)qRT-PCR檢測Fox

2、p3mRNA的表達水平（人GAPDH作為內(nèi)參照基因）。每一份標本的SYBRⅡ熒光定量PCR反應(yīng)做3個重復(fù)管，取平均CT值計算。同一標本擴增基因得到的CT值分別標記為CTGAPDH和CTFOXP3，以△CT目的基因=CT目的基因-CTGAPDH計算得到△CTFOxP3，△△CT=△CT實驗-△CT對照組，差別倍數(shù)2-△△CT。用2-△△CT的方法分析比較各組的RNA相對表達水平變化。
　　采用夾心抗體酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別

3、檢測患者組及對照組血清中IL-10，TGF-β的水平，分別比較兩組血清中IL-10，TGF-β水平的差異，用(x)±s表示用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行獨立樣本t檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計意義。
　　實驗結(jié)果：
　?。ㄒ唬〢D患者及健康人中Foxp3+mRNA表達水平:
　　qRT-PCR結(jié)果顯示:Foxp3mRNA在AD組的表達和正常對照組比較，表達水平是健康對照組的76.8％，即低于正常組。
　?。ǘ〢D患者

4、及健康人中IL-10，TGF-β的水平:
　　1.IL-10水平:患者組為（117.112±60.854）高于對照組(53.609±36.393)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.TGF-β水平:患者組（1011.896±575.206）高于對照組(483.533±373.044)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、AD患者T細胞表達Foxp3較對照組減少。
　　2、AD患