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1、目的:通過(guò)觀察synaptopodin在IgA腎病患者腎組織中的表達(dá)情況,并與已有的IgA腎病分級(jí)方法進(jìn)行比較分析,探討其對(duì)IgA腎病進(jìn)展的影響,以期為IgA腎病的分級(jí)、預(yù)測(cè)病情預(yù)后及治療提供理論依據(jù)。
方法:回顧分析2003年6月至2009年9月在我院經(jīng)腎活檢明確診斷為IgA腎病患者的202例腎活檢組織標(biāo)本。所有標(biāo)本已經(jīng)過(guò)苦味酸液固定、石蠟包埋,2μm厚度切片,均行蘇木素伊紅染色(HE)、過(guò)碘酸雪夫反應(yīng)(PAS)、六胺銀
2、染色(PASM)和馬松三色染色(Masson),結(jié)合IgA等免疫熒光檢測(cè)后已確診為IgA腎病,所有染色標(biāo)本均在冰箱中存放。復(fù)習(xí)病歷,排除狼瘡性腎炎、紫癜性腎炎及慢性肝病等繼發(fā)性IgA腎病病例。所有的病例在當(dāng)初確診時(shí)已按Lee分級(jí)系統(tǒng)分為Ⅰ~Ⅴ級(jí)(分類(lèi)),按分層抽樣的原則,用隨機(jī)號(hào)碼表抽取樣本,從各級(jí)中分別隨機(jī)選取10例標(biāo)本。分5組,總共標(biāo)本50例。對(duì)選取50例樣本,從冰箱中調(diào)出已染色的病理標(biāo)本,重新通過(guò)光鏡觀察,參照Katafuchi積
3、分方法,依據(jù)病變程度進(jìn)行積分。對(duì)選取的樣本經(jīng)抗人synaptopodin單克隆抗體間接免疫熒光染色。用免疫熒光顯微鏡觀察,在拍攝熒光照片。對(duì)所得的照片用Imagerpro6.0圖像分析軟件進(jìn)行定量分析腎組織中synaptopodin的表達(dá)情況,測(cè)量每個(gè)腎小球截面總的積分光密度值(IOD SUM)及所測(cè)腎小球截面的面積(areaSUM),計(jì)算出平均光密度值(mean density=(IOD SUM)/(area sum))。數(shù)據(jù)結(jié)果計(jì)量
4、資料列表來(lái)顯示,因所有的病例按Lee分級(jí)分為Ⅰ~Ⅴ級(jí)為多個(gè)獨(dú)立樣本的等級(jí)計(jì)量資料,所以5組腎組織中synaptopodin所表達(dá)的平均光密度值、Katafuchi積分進(jìn)行組間比較將采取Kruskal-Wallis H檢驗(yàn),并對(duì)synaptopodin所表達(dá)的平均光密度值與Katafuchi積分進(jìn)行相關(guān)分析。Spss16.0軟件對(duì)相關(guān)指標(biāo)作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:
1.對(duì)5組的IgA腎病患者腎組織中synaptop
5、odin所表達(dá)的平均光密度值進(jìn)行比較,5組組間有差別(P<0.01),對(duì)Ⅰ到Ⅴ級(jí)5組病例觀察,synaptopodin在腎臟病理組織中的表達(dá)逐漸減少。
2.5組的IgA腎病患者腎組織Katafuchi積分進(jìn)行比較,5組組間有差別(P<0.01),從Ⅰ到Ⅴ級(jí)5組腎臟病理標(biāo)本的Katafuchi積分值逐漸增加。
3.50例腎病理組織中synaptopodin所表達(dá)的平均光密度值與Katafuchi積分存在負(fù)相關(guān)關(guān)
6、系(r=-0.922,P<0.01)。
4.每組腎臟病理組織中synaptopodin的表達(dá)與Katafuchi積分均存在負(fù)相關(guān)關(guān)系。
結(jié)論:Synaptopodin在原發(fā)性IgA腎病患者腎組織中的表達(dá)隨著腎臟纖維化程度的加重而減少,與傳統(tǒng)的評(píng)估指標(biāo)比較,從Ⅰ到Ⅴ級(jí)5組病例觀察,synaptopodin在腎臟病理組織中的表達(dá)逐漸減少。并且腎臟病理組織中synaptopodin的表達(dá)與Katafuchi積分均存
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