NF-κB在急性心肌梗死后心室重塑中的作用研究.pdf

1、目的：通過細(xì)胞免疫化學(xué)染色觀察AMI后心室重塑患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMCs)的NF-κB的活化水平，及其與血清腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-a，TNF-a)、白介素-1β(interleukin-1β，IL-1β)分泌的相關(guān)性，來探討NF-κB在急性心肌梗死后心室重塑中的作用機(jī)制。
　　 方法：選擇2008年12月-2009年

2、9月入院的首次發(fā)病的AMI的患者58例。收集病人一般資料，如無禁忌所有病人均給予ACEI、β-受體阻滯劑、他汀類、阿司匹林等藥物治療，有經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(percutaneous transluminal coronary intervention，PCI)和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈內(nèi)成形術(shù)(percutaneous transcoronary coronary angioplasty，PTCA)適應(yīng)癥的給予相應(yīng)治療。所有患者：(1)分組：以Δ

3、LVEDVI>20[％]作為AMI后心室重塑的分組標(biāo)準(zhǔn)[1-2]。AMI發(fā)病后第3天、30天進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢查，按Simpson法計(jì)算左心室舒張末期容積，經(jīng)體表面積校正后計(jì)算出左心室舒張末期容積指數(shù)(index end-diastolic volume of left ventricular，LVEDVI)。再進(jìn)一步計(jì)算出ΔLVEDVI=[(30天LVEDVI-3天LVEDVI)/3天LVEDVI]。把AMI患者58例分兩組(62例失訪

4、4例)：A組：左心室重塑組(ΔLVEDVI>20[％])33例。B組：無左心室重塑組(ΔLVEDVI≤20[％])25例。C組：對(duì)照組(門診體檢健康者)20例。(2)提取PBMCs：PBMCs分離采取密度梯度法提取法。于發(fā)病3天，14天采集周圍靜脈抗凝血4ml，立即加入白細(xì)胞分離液，立即用水平離心機(jī)3000r/min離心20分鐘，吸取中間云霧層即為單個(gè)核細(xì)胞，用丙酮固定在玻片上，存放在-70℃冰箱。(3)檢測(cè)PBMCs 中的NF-κB活

5、性：根據(jù)親和免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)SABC原理，將固定在玻片上的PBMCs 細(xì)胞按實(shí)驗(yàn)步驟分別加入一抗、二抗后進(jìn)行染色，觀察NF-κB活化程度。(用PBMCs細(xì)胞核中NF-κB (+)cell的染色陽性百分率表示NF-κB的活化程度)(4)測(cè)定血清細(xì)胞因子TNF-α、IL-1β含量：于發(fā)病3天，14天采集周圍靜脈血2ml，離心后取其上清液，采用放射免疫法對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)定，利用液相競(jìng)爭(zhēng)抑制原理，由GC-1200 r 放射免疫計(jì)數(shù)器查出樣品濃度。<

6、br>　　 結(jié)果：
　　 (1)三組的年齡、性別構(gòu)成無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。急性心肌梗死患者的心腦血管病家族史、高血脂、吸煙史等危險(xiǎn)因素及高血壓、糖尿病合并癥較對(duì)照組(C組)明顯增多，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P<0.001)。但A組和B組梗死部位、危險(xiǎn)因素和合并癥均無顯著差異，P>0.05，具有可比性。
　　 (2)AMI發(fā)病3天時(shí)，A組和B組NF-κB 活性及TNF-a、IL-1β濃度顯著高于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01；雖A組的

7、NF-κB活性及TNF-a、IL-1β濃度稍高于B組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。
　　 AMI發(fā)病14天時(shí)，A組NF-κB活性及TNF-a、IL-1β濃度顯著高于B組和C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01；雖B組的NF-κB 活性及TNF-a、IL-1β濃度稍高于C組，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。
　　 (3)通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)：A組患者3天、14天，外周血單個(gè)核細(xì)胞NF-κB核染色陽性百分率與TNF-α、IL-1β表達(dá)均

8、呈正相關(guān)。R TNF-α(3d、14d)=0.649，0.535，P<0.01；rIL-1β(3d、14d)=0.463，0.447，P<0.01)。
　　 結(jié)論：1)AMI后心室重塑患者外周血NF-κB活性升高，可持續(xù)數(shù)天至數(shù)周，可能參與AMI后心室重塑。(2)急性心肌梗死后 VRM過程中NF-κB持續(xù)活化伴有TNF-α，IL-1β分泌增多，且NF-κB核染色陽性百分率與細(xì)胞因子分泌呈正相關(guān)，說明NF-κB表達(dá)上調(diào)促進(jìn)細(xì)胞因子