前列腺癌及其骨轉移灶miRNA差異表達的研究.pdf

1、目的:近年來，我國前列腺癌的發(fā)病率有顯著增長的趨勢，在許多情況下，原發(fā)腫瘤沒有癥狀或術后并無復發(fā)，卻發(fā)生遠處轉移，其中骨轉移最為常見。前列腺癌一旦發(fā)生骨轉移，即已進入腫瘤晚期，約70％的前列腺癌患者死于骨轉移。越來越多證據(jù)顯示，miRNA在腫瘤轉移中起著重要作用，控制腫瘤轉移。最近發(fā)現(xiàn)某些miRNA缺乏能加速腫瘤擴散，可推測這些miRNA能發(fā)揮抑制腫瘤轉移的作用。本實驗試圖通過比較前列腺癌原發(fā)灶及其骨轉移灶中miRNA表達量，尋找差異表

2、達的miRNA，探討其意義并進行后續(xù)研究。
　　 材料和方法:
　　 人體前列腺癌及配對骨轉移標本6對；非配對前列腺癌組織標本22個，前列腺骨轉移組織標本16個，均為石蠟標本。提取出總RNA并鑒定質量。采用miRNA芯片技術篩選差異表達的miRNA，并確定IScore(d)1>2且差異倍數(shù)為2倍以上時，q-value(％)≤5為有意義的差異表達miRNA。采用實時熒光定量PCR檢測法在17個前列腺癌標本和13個骨轉移標本

3、中驗證10個芯片差異表達的miRNA。
　　 結果:
　　 一、芯片篩選miRNA
　　 1.配對樣本差異表達hsa-miR。僅1對配對樣本的總RNA量達到芯片所需用量，故僅對此一對樣本進行基因芯片分析，發(fā)現(xiàn)相對原發(fā)癌部位，轉移灶中高表達的miRNA有18個，低表達有3個，后者分別是hsa-m1R-612、hsa-m1R-143與hsa-miR-145。
　　 2.非配對樣本差異表達hsa-miR。前列腺

4、癌及骨轉移組織非配對miRNA表達結果顯示，在骨轉移組織中miR-143、miR-145、miR-100、miR-125b低表達最為顯著，表達差異均超過4倍。
　　 一、miRNA實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測
　　 比較腫瘤原發(fā)標本和轉移灶標本，發(fā)現(xiàn)m1R-143、miR-145、miR-100及miR-125b在骨轉移組織中較原發(fā)腫瘤的表達下調與芯片結果一致，倍數(shù)分別為15倍、21倍、2倍及3倍。統(tǒng)計學分析

5、顯示，與前列腺癌原發(fā)灶組織相比較，轉移灶中m1R-143、miR-145及m1R-125b的下調差異有顯著性意義。
　　 結論:
　　 一、前列腺癌原發(fā)灶和轉移灶中存在多個差異表達的miRNA。
　　 二、hsa-mir-143、hsa-mir-145與hsa-mir-125b低表達量最為明顯，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　 三、hsa-mir-143、hsa-mir-145與hsa-mir--125b在轉移