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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:
乳腺癌是現(xiàn)代女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是其致死的主要原因,研究其浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移的機(jī)制是治療乳腺癌的關(guān)鍵。
目的:
觀察人乳腺癌及其癌旁組織CD44v6和Fascin-1蛋白的差異表達(dá),分析其與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系及其在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的意義,同時(shí)分析CD44v6和Fascin-1蛋白在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的相關(guān)性,篩選合適的乳腺癌細(xì)胞株為乳腺癌的基因治療提供參考。
材料和方法:
2、> (一)免疫組織化學(xué)法
選用乳腺癌組織芯片為標(biāo)本,其中臨床資料完善者65例作為免疫組織化學(xué)標(biāo)本,每例標(biāo)本均采集癌及癌旁組織各兩點(diǎn),正常乳腺組織65例,分析其在兩組標(biāo)本間的表達(dá)差異。根據(jù)所獲得的標(biāo)本的臨床病理特征(年齡、腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分級(jí)、TNM分期、ER、PR、c-erbB-2、ki67、P53、P16、E-cadherin)進(jìn)行分組,觀察乳腺癌組織中Cd44v6和Fascin-1蛋白表達(dá)差異,分析
3、Cd44v6和Fascin-1蛋白的差異表達(dá)與乳腺癌基本臨床病理特征的相關(guān)性,了解Cd44v6和Fascin-1蛋白在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中的意義,并分析兩者之間的相關(guān)性。
(二)Western blot及RT-PCR
選用乳腺癌細(xì)胞株MCF-7,T-47D,MDA-MB-231及正常乳腺組織細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),通過(guò)Western blot分析各細(xì)胞株間CD44v6和Fascin-1蛋白的表達(dá)量,同時(shí)進(jìn)行RT-PCR,進(jìn)行
4、乳腺癌細(xì)胞株的篩選,為下一步進(jìn)行基因干擾選擇合適的細(xì)胞株。
結(jié)果:
1、免疫組織化學(xué)結(jié)果:65例乳腺癌組織中fascin-1和CD44v6蛋白的表達(dá)明顯高于癌旁組織(P<0.05),fascin-1蛋白的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡、分級(jí)、ER、PR、Cerb-2、Ki-67、P53及P16無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05),但是與腫瘤的分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05);Cd44v6蛋白的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡、腫瘤的大小、
5、ER、PR、P53及P16無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05),與腫瘤的分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Cerb-2及Ki-67的表達(dá)具有相關(guān)性(P<0.05)。
2、Western blot結(jié)果:Fascin-1和CD44v6蛋白在乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)高于對(duì)照組,P<0.05,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且fascin-1在MCF-7組中表達(dá)高于另外三組,而CD44v6蛋白在T-47D組中表達(dá)高于其他組,經(jīng)RT-PCR證實(shí)了同樣的結(jié)果。
結(jié)論:
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