蒼耳素Ⅱ有效抑菌成分的分離純化及其劑型加工.pdf

1、蒼耳素Ⅱ是從植物蒼耳中提取分離出的抑菌活性物質(zhì)，對番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)、辣椒絲核病菌(Rhizoctonia solani)、黃瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium Sch1.)、黃瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum Ell.et Arthur)和番茄早疫病菌等蔬菜常見病害有較強(qiáng)的抑制作用【1】。本文通過對蒼耳素Ⅱ中的抑菌成分進(jìn)一步分離純化及鑒定，獲得蒼耳素

2、Ⅱ活性物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式，通過對制劑助劑的篩選研究，確定了制劑配方中最佳助劑及乳油、水乳劑劑型配方，加工成了20％蒼耳素Ⅱ乳油(EC)及10％蒼耳素Ⅱ水乳劑(EW)，并進(jìn)行了質(zhì)量檢測和室內(nèi)藥效評(píng)價(jià)。研究內(nèi)容及所得結(jié)果如下： 1.以氯仿-丙酮(體積比30:2)混合溶劑為淋洗液采用柱層析法對蒼耳素Ⅱ分離物進(jìn)一步分離純化，經(jīng)柱層析分離后抑菌成分主要集中在流分2到流分5中，其抑制率大于30％。以流分3對黃瓜枯萎病菌菌絲生長的抑制率最高為9

3、6.79％：對黃瓜黑星病菌菌絲生長的抑制率最高為84.80％。流分3經(jīng)過二次柱層析得到32個(gè)流分，而活性也主要集中在2～6流分之間，對枯萎病菌抑制較高的是流分2(抑菌率為38.25％)，而對黑星病菌抑制作用最高的是流分3(抑菌率為49.12％)。 對高活性流分采用柱層析和GC.MS聯(lián)用儀鑒定，蒼耳素Ⅱ主要抑菌物質(zhì)有：棕櫚酸、十八烷酸、西柏二烯-丙烯酸內(nèi)酯、二十烷酸、鄰苯二甲酸單異辛酯、十八烯-9-酸、3，5.二特丁基-2-羥基.

4、苯丙酸、十六烯-9-酸、降姥鮫酮-2、5-丙氧基-6-甲氧基-8-胺基-喹啉、鄰苯二甲酸單乙酸乙酯酯、3-苯基-2，4-戊二酮、2-烯丙基-1，4-二甲氧基-3-乙烯氧甲基苯、乙酸三甲基苯酚酯、鄰苯二甲酸單乙酯、二十二烷酸、角鯊烯及未知物質(zhì)等41種物質(zhì)，可以證實(shí)蒼耳提取物蒼耳素II中存在大量的抑菌活性物質(zhì)。 2.以蒼耳素Ⅱ?yàn)樵?，通過對其加工助劑及配合量的篩選研究，確定了二甲苯，二甲基甲酰胺(DMF)，農(nóng)乳0203B為最適的溶劑

5、、助溶劑、乳化劑，加工出了質(zhì)量穩(wěn)定的20％蒼耳素Ⅱ乳油。質(zhì)量檢測結(jié)果表明該制劑符合國家標(biāo)準(zhǔn)。 3.在蒼耳素Ⅱ加工成乳油的基礎(chǔ)上，初步進(jìn)行了蒼耳素Ⅱ水乳劑的開發(fā)研究。通過對其加工助劑及配合量的篩選研究，確定了二甲基甲酰胺(DMF)，N-長鏈烷基吡咯烷酮，乙二醇，10％NaCl溶液，農(nóng)乳500、農(nóng)乳600及BY140按一定比例混配為最適的溶劑、助溶劑、抗凍劑、乳化劑，加工出了10％蒼耳素Ⅱ水乳劑制劑。并對水乳制劑的進(jìn)行了質(zhì)量檢測，各