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1、貴州民間苗藥用短翅豆芫菁體液或蟲粉治療尋常疣后,尋常疣瘤體萎縮、消失,感染部位皮膚變?yōu)檎?。但短翅豆芫菁體液或蟲粉中是什么成分對(duì)尋常疣有療效,是單一成分起作用,還是多種成分協(xié)同作用,其作用機(jī)理怎樣,沒有相關(guān)的報(bào)道。 本研究主要以高效液相色譜、離子色譜分析短翅豆芫菁體液和蟲粉提取液中成分。通過細(xì)胞活性篩選實(shí)驗(yàn),初步確定體液或蟲粉中對(duì)尋常疣起療效作用的活性成分,為進(jìn)一步研究活性成分對(duì)尋常疣的作用機(jī)理提供理論依據(jù)。 一、短翅豆
2、芫菁成分分析試驗(yàn) 短翅豆芫菁中斑蝥素的定性定量試驗(yàn)結(jié)果表明,高效液相色譜法分析短翅豆芫菁斑蝥素時(shí)色譜條件為:檢測(cè)波長227nm,流動(dòng)相甲醇0.3ml/min-水0.7ml/min,在此色譜條件下測(cè)得平均每只成蟲體液中斑蝥素含量為26.60Ug,卵中斑蝥素的平均含量為0.0917%。 短翅豆芫菁斑蝥素提取實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,提取烘干短翅豆芫菁中斑蝥素的最佳提取時(shí)間為12小時(shí)。柱層析色譜法分離斑蝥素,以二氯甲烷一乙酸乙酯為流動(dòng)相,
3、提取物經(jīng)兩次干法柱層析后則可將斑蝥素分離純化,斑蝥素純度超過90%,且損失少、用時(shí)短、消耗溶劑少。 短翅豆芫菁體液的甲酸測(cè)定色譜條件:以2.0mmol/LNaHCO3為流動(dòng)相,流速1.5ml/min,以此色譜條件下測(cè)得10個(gè)樣品中每只成蟲體液中甲酸的含量2.2355ug~18.2800ug,說明在成蟲中甲酸的含量差異較大。 二、短翅豆芫菁成分細(xì)胞活性試驗(yàn) 斑蝥素對(duì)人白血病細(xì)胞株K562活性篩選試驗(yàn)表明,斑蝥素濃度
4、為l×10-33mol/L時(shí)對(duì)K562細(xì)胞抑制率為21%,與陽性對(duì)照物阿霉素2.5×10-77mol/L相當(dāng),說明斑蝥素對(duì)K562細(xì)胞不敏感,對(duì)此細(xì)胞的抑制作用較弱。斑蝥素對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL-7402的藥物活性篩選結(jié)果表明,斑蝥素在三個(gè)濃度下對(duì)BEL-7402都有一定的抑制作用。與5-Fu陽性對(duì)照物相比,相同濃度下即1×10-44mol/L、1×10-5mol/L斑蝥素對(duì)肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞抑制作用較5-Fu好,說明柱層析所得的
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