卵巢癌抗體芯片表達(dá)及其與患者免疫狀態(tài)、女性生殖激素和CA125變化的相關(guān)性研究.pdf

1、本研究是運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究的新技術(shù)—蛋白抗體芯片，動(dòng)態(tài)檢測(cè)卵巢癌患者血清和卵巢癌組織中的蛋白質(zhì)組表達(dá)譜，篩選出差異表達(dá)蛋白質(zhì)，分析異常表達(dá)蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能，并與患者的免疫狀態(tài)、女性生殖激素和腫瘤標(biāo)記物的變化進(jìn)行比較，探索其間的關(guān)系和規(guī)律。通過(guò)多角度、多層面的綜合分析，從整體水平上探討卵巢癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)理，同時(shí)也尋找與卵巢癌相關(guān)或具有特異的生物標(biāo)志分子，為卵巢癌的早期診斷、評(píng)估療效以及判斷預(yù)后提供新的分子標(biāo)志物，為卵巢癌的治療提供新靶點(diǎn)

2、。研究分為以下五個(gè)部分： 第一部分抗體芯片篩選卵巢癌組織的差異表達(dá)蛋白 目的:應(yīng)用抗體芯片(含512種細(xì)胞重要功能蛋白)在正常卵巢與卵巢癌組織間篩選差異表達(dá)蛋白。 結(jié)論:抗體芯片是一種重要而有效的比較蛋白質(zhì)組研究手段，所發(fā)現(xiàn)的異常表達(dá)蛋白將有助子研發(fā)卵巢癌診斷標(biāo)志分子和療效監(jiān)控。找到六個(gè)與免疫功能相關(guān)的差異表達(dá)蛋白。 第二部分抗體芯片篩選卵巢癌患者術(shù)前血清的差異表達(dá)蛋白 目的:應(yīng)用抗體芯片篩選健康

3、婦女與卵巢癌術(shù)前血清間差異表達(dá)蛋白，并與組織樣本的抗體芯片結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)論:抗體芯片的研究樣品可以是組織，血清等。FADD、RAP1A、TGF-β1、p53和G3BP這五種蛋白質(zhì)在術(shù)前血清和組織中均呈現(xiàn)一致的表達(dá)，表明它們?cè)谏掀ば月殉舶┑陌l(fā)生發(fā)展中起重要作用。 第三部分卵巢癌患者治療前后血清抗體芯片表達(dá)的比較 目的:了解在蛋白質(zhì)表達(dá)水平上，腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)和化療對(duì)卵巢癌患者的影響，以及術(shù)前、術(shù)后及全程化療結(jié)束后

4、卵巢癌患者血清蛋白質(zhì)組譜的變化規(guī)律。 結(jié)論:手術(shù)和化療在卵巢癌患者的治療中仍很重要，可能的致病因素逐漸減少。在三組血清芯片中共篩選出11個(gè)與細(xì)胞增殖凋亡相關(guān)的差異表達(dá)蛋白質(zhì)，其數(shù)目與治療措施呈負(fù)相關(guān)。XPA和Mcm2同步先高后低的異常表達(dá)，可能與耐藥或復(fù)發(fā)有關(guān)。 第四部分卵巢癌患者手術(shù)前后及化療前后免疫狀態(tài)及與抗體芯片篩選差異蛋白的關(guān)系 目的:動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)相關(guān)的機(jī)體免疫指標(biāo)，了解卵巢癌患者在手術(shù)前、手術(shù)后及化療后的免

5、疫狀態(tài)，并與患者的血清抗體芯片結(jié)果進(jìn)行比較，以期發(fā)現(xiàn)卵巢癌患者的免疫狀態(tài)特點(diǎn)和變化規(guī)律，為患者的免疫治療提供依據(jù)。 結(jié)論:卵巢上皮性癌患者的免疫功能低下，手術(shù)和化療后會(huì)加重患者免疫功能低下?tīng)顟B(tài)，應(yīng)引起重視。三組抗體芯片篩選出的與免疫功能相關(guān)的六個(gè)差異性蛋白的表達(dá)，與患者免疫功能低下的結(jié)果相符。 第五部分卵巢癌患者手術(shù)及化療前后女性生殖激素和CA125的變化及與抗體芯片篩選差異蛋白的關(guān)系 目的:動(dòng)態(tài)檢測(cè)了卵巢癌患者

6、卵巢和垂體分泌的生殖激素以及CA125的水平，了解患者在手術(shù)前、手術(shù)后及全程化療結(jié)束后女性生殖激素的特點(diǎn)和CA125變化，并分別與患者的血清抗體芯片結(jié)果進(jìn)行比較，以期發(fā)現(xiàn)相關(guān)規(guī)律，為女性生殖激素在上皮性卵巢癌治療中的應(yīng)用以及評(píng)估機(jī)體內(nèi)卵巢癌細(xì)胞的消長(zhǎng)提供重要的參考資料。 結(jié)論:卵巢上皮性癌組織可能具有分泌孕激素的功能，而且FSH對(duì)卵巢癌細(xì)胞的生長(zhǎng)可能會(huì)有影響。RAP1A、CHGA、BCAR1和GABAbR2是與內(nèi)分泌功能相關(guān)的差

7、異表達(dá)蛋白，它們的高表達(dá)狀態(tài)說(shuō)明卵巢癌患者的內(nèi)分泌系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)。共有八個(gè)差異表達(dá)蛋白可能會(huì)成為評(píng)估卵巢癌細(xì)胞在體內(nèi)的消長(zhǎng)情況的新指標(biāo)。 小結(jié):本課題應(yīng)用蛋白質(zhì)芯片中最成熟的抗體芯片技術(shù)分別篩選了上皮性卵巢癌組織、患者術(shù)前血清、患者術(shù)后血清和患者化療后血清樣品中的差異表達(dá)蛋白。同時(shí)動(dòng)態(tài)檢測(cè)患者的免疫功能和狀態(tài)，女性生殖激素和CA125水平的變化，并與蛋白質(zhì)芯片結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果表明：FADD、RAP1A、TGF-β1、p53和

8、G3BP這五種蛋白在術(shù)前血清組和組織中均呈現(xiàn)一致的表達(dá)，表明它們?cè)谏掀ば月殉舶┑陌l(fā)生發(fā)展中起重要作用。從三組血清抗體芯片結(jié)果來(lái)分析，篩選的差異表達(dá)蛋白數(shù)目遞減，隨著治療手段(手術(shù)或化療)的增多，可能的致病因素將逐漸減少。三組共篩選出11個(gè)與細(xì)胞增殖凋亡相關(guān)的異常表達(dá)蛋白質(zhì)，其數(shù)目隨治療措施增多而明顯下降，說(shuō)明手術(shù)和化療在卵巢癌患者的治療中仍很重要。篩選出六個(gè)與免疫功能相關(guān)的差異性蛋白的表達(dá)，與動(dòng)態(tài)檢測(cè)的卵巢上皮性癌患者免疫功能結(jié)果相符。

9、XPA和Mcm2有同步的先高后低的異常表達(dá)，可能與耐藥或復(fù)發(fā)有關(guān)。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)免疫結(jié)果表明，卵巢癌患者無(wú)論術(shù)前、術(shù)后還是化療后免疫功能均明顯低下低下，應(yīng)及時(shí)干預(yù)。RAP1A、CHGA、BCAR1和GABAbR2是與內(nèi)分泌功能相關(guān)的差異表達(dá)蛋白，它們的高表達(dá)狀態(tài)說(shuō)明卵巢癌患者的內(nèi)分泌系統(tǒng)處于活躍狀態(tài)。與CA125水平對(duì)照，還篩選出八個(gè)差異表達(dá)蛋白有可能會(huì)成為評(píng)估卵巢癌細(xì)胞在體內(nèi)的消長(zhǎng)情況的新指標(biāo)。抗體芯片是一種重要而有效的比較蛋白質(zhì)組研究手段