ERCC1、p53的表達(dá)與晚期NSCLC患者含鉑方案化療敏感性的關(guān)系研究.pdf

1、在我國,肺癌的發(fā)病率和死亡率均居惡性腫瘤首位,而非小細(xì)胞肺癌(non-smallcell lung cancer NSCLC)占所有肺癌患者80％左右,其中65％～70％的NSCLC就診時已處于晚期。因此,化療在Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者綜合治療中占重要地位。自80年代以來,隨著第三代化療新藥異長春花堿、吉西他濱及紫杉類等藥物的開發(fā)和利用,以鉑類為基礎(chǔ)聯(lián)合第三代化療新藥的方案已成為NSCLC標(biāo)準(zhǔn)化療(StandardChemotherapy

2、 SC)方案,但是化療反應(yīng)率(Response Rate RR)和中位生存時間(MedianSurvival Time MST)仍然很低。由于遺傳的異質(zhì)性,同一種病理類型和分期的NSCLC對同一種化療方案敏感性差異很大。因此在2004美國腫瘤臨床學(xué)會(AmericanSociety of Clinical Oncology ASCO)年會上提出了個體化療(tailor chemotherapy TC)概念并成為研究熱點。TC是根據(jù)癌癥病

3、人的遺傳學(xué)特點使用對其最佳的化療藥物,以提高化療敏感性,提高RR及MST,同時將化療的副作用降至最低。由于條件限制體外腫瘤細(xì)胞藥物敏感性試驗較少開展,而且體外藥敏結(jié)果與體內(nèi)藥物敏感性差異很大,表明腫瘤細(xì)胞的內(nèi)在的化療敏感性有顯著不同。DNA損傷修復(fù)系統(tǒng)作為機(jī)體抵抗各種損傷的分子基礎(chǔ)。對于維護(hù)基因組的穩(wěn)定與完整起著至關(guān)重要的作用;然而對于通過損傷DNA殺死癌細(xì)胞的放、化療,這一過程無疑削弱了治療效果。因此能夠提示化療藥物敏感性及預(yù)后的分子

4、標(biāo)記物在TC方案制定中將發(fā)揮重要作用。切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(Excision repair cross-complementation group1 ERCCl)、p53是與肺癌化療耐藥關(guān)系密切的兩個重要基因,在化療前對NSCLC組織進(jìn)行p53、ERCC1基因檢測可以使化療藥物的應(yīng)用更個體化,更具科學(xué)性和合理性。本研究在征得患者知情同意和符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)原則的前提下,檢測49例NSCLC手術(shù)患者組織、外周血淋巴細(xì)胞(peripheral

5、 blood lymphocyte,PBL)化療敏感性分子標(biāo)記物ERCC1、p53蛋白表達(dá),術(shù)前血清p53抗體水平,證實NSCLC癌組織與患者PBL中ERCC1、p53表達(dá)呈顯著正相關(guān);檢測74例晚期NSCLC患者PBL中ERCC1、p53表達(dá),對ERCC1、p53與含鉑方案(TP、NP或GP)化療敏感性的關(guān)系進(jìn)行了研究,證實ERCC1,p53高表達(dá)與NSCLC患者順鉑類化療藥物的耐藥顯著相關(guān)。本研究為TC藥物選擇提供參考,以期提高化療

6、敏感性,提高M(jìn)ST及RR。
　　 研究目的
　　 1.檢測p53、ERCC1在NSCLC癌組織、癌旁組織、和外周血淋巴細(xì)胞(peripheralblood lymphocytes,PBL)的表達(dá),探討p53、ERCCl在癌組織和PBL中表達(dá)的相關(guān)性;
　　 2.探討Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者PBL中p53、ERCC1的表達(dá)與鉑類SC方案化療敏感性關(guān)系:
　　 3.探討NSCLC p53蛋白表達(dá)與血清p53抗體

7、的相關(guān)性。
　　 研究內(nèi)容和方法
　　 1.p53、ERCC1在NSCLC癌組織表達(dá)及其臨床意義:采用免疫熒光化學(xué)方法檢測49例NSCLC癌組織和PBL中p53、ERCCl蛋白表達(dá),分析p53、ERCC1表達(dá)與NSCLC臨床病理因素的關(guān)系,探討NSCLC癌組織和PBL中p53、ERCC1表達(dá)的相關(guān)性,為進(jìn)一步以PBL內(nèi)p53、ERCC1表達(dá)情況為依據(jù)制定TC方案提供臨床病理依據(jù)。
　　 2.PBL中ERCC1、p

8、53的表達(dá)與Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者含鉑類標(biāo)準(zhǔn)化療方案敏感性的關(guān)系:采用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測74例晚期NSCLC患者PBL中p53、ERCC1蛋白表達(dá)。給予患者2~4療程鉑類為基礎(chǔ)的SC化療,對病人化療后的總生存期(OS)、腫瘤進(jìn)展時間(TTP)、化療療效及一年生存率進(jìn)行評價。
　　 3.NSCLC患者血清p53抗體檢測及其與化療敏感性相關(guān)性研究:采用免疫熒光化學(xué)染色方法檢測NSCLC患者ERCC1、p53蛋白表達(dá),ELI

9、SA檢測術(shù)前血清p53抗體濃度,術(shù)后給予患者鉑類為基礎(chǔ)的SC化療,對近期療效進(jìn)行評價。
　　 研究結(jié)果
　　 1.p53、ERCC1在NSCLC癌組織表達(dá)及其臨床意義:p53、ERCC1主要呈細(xì)胞核染色,在細(xì)胞核內(nèi)均勻分布,一些腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)中也有表達(dá),集中于核膜周圍。
　　 2.癌組織、癌旁組織、正常肺組織、NSCLC的PBL和健康人的PBL的ERCC1陽性率分別為55.10％、26.53％、10.2％、51.

10、10％和10％,p53陽性率分別為63.26％、30.61％、8.186、59.18％和5％,NSCLC患者癌組織和PBL的ERCC1、p53表達(dá)陽性率均高于癌旁組織、正常肺組織、健康人PBL(P＜0.01)。癌組織及PBL中ERCC1、p53表達(dá)率與臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05)。
　　 3.NSCLC癌組織與患者PBL中ERCC1、p53表達(dá)呈顯著正相關(guān)(x2=14.8596 p＜0.01;x2=21.291.p＜

11、0.01)。
　　 4.ERCC1、p53的表達(dá)與Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者含鉑類標(biāo)準(zhǔn)化療方案敏感性的關(guān)系:根據(jù)ERCC1,p53免疫熒光標(biāo)記結(jié)果將NSCLC患者分為4組:EP組(陽性組:ERCCI及p53均高表達(dá)組)37例、N組(陰性組:ERCC1及p53均低表達(dá)組)29例、E組(僅ERCC1高表達(dá)組)4例、P組(僅p53高表達(dá)組)4例。4組患者的OS分別為(月)10.65±4.91、14.17±6.63、11.00+7.5、11

12、.50±5.75。TTP分別為(月)7.78±4.59、12.41±7.16、8.25±7.75、10.75±6.12,組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05),兩組間兩兩比較結(jié)果示N組與其它各組間OS及TTP差異均有統(tǒng)計意義(P＜0.01),而其它3組間OS及TTP差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);N組化療后RR為65.52％,顯著高于EP組35.13％,而其它3組間比較則沒有統(tǒng)計意義(P＞0.05)。提示:ERCC1和p53均低表達(dá)的

13、NSCLC患者,可以更好的從含鉑類藥物化療方案中受益。
　　 5.p53蛋白在NSCLC高分化、中分化和低分化患者癌組織中的陽性表達(dá)率分別為:37.50％、53.84％和90.00％,p53陽性表達(dá)率與腫瘤分化程度顯著相關(guān)(P=0.004);p53抗體在NSCLC高分化、中分化和低分化患者血清中的陽性率分別為43.75％、30.77％和75.00％,血清p53抗體與腫瘤分化程度相關(guān)(P=0.03)。49例NSCLC患者癌組織p5

14、3蛋白、血清p53抗體均陽性20例,均陰性12例,癌組織p53蛋白陽性而血清p53抗體陰性2例,癌組織p53蛋白陰性而血清p53抗體陽性5例。NSCLC患者癌組織p53蛋白與血清p53抗體表達(dá)相關(guān)(X2=4.446 P=0.035)。
　　 結(jié)論
　　 1、NSCLC癌組織p53、ERCC1表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期以及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。
　　 2、檢測NSCLC患者PBL的p53、ERCC1表達(dá)可間接反映

15、NSCLC組織的p53、ERCC1表達(dá)狀況。
　　 3、PBL中p53、ERCC1表達(dá)情況與含鉑化療方案敏感性顯著相關(guān)。
　　 4、PBL中p53、ERCC1可作為含鉑化療方案化療敏感性及預(yù)后分子標(biāo)記物,二者均低表達(dá)的NSCLC患者為最適含鉑案TC靶向人群。
　　 5、p53蛋白、血清p53抗體陽性NSCLC患者,腫瘤分化程度低、惡性程度高。
　　 6、癌組織p53蛋白和血清p53抗體聯(lián)合檢測將有助于NS