小麥抗葉銹病近等基因系TcLr10與Thatcher蛋白質(zhì)組表達(dá)差異分析.pdf

1、小麥葉銹病是小麥生產(chǎn)上的一個(gè)重要病害，威脅和阻礙小麥生產(chǎn)。本研究利用雙向電泳技術(shù)分析TcLr10與Thatcher在未接種小麥葉銹菌，和接種后的蛋白質(zhì)組差異。利用質(zhì)譜技術(shù)對(duì)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行了肽質(zhì)量指紋(Peptide MassFingerprinting PMF)分析?？梢杂纱诉M(jìn)一步分析這些蛋白質(zhì)的氨基酸種類及其序列，為利用基因工程進(jìn)行抗病育種提供重要依據(jù)。 本研究以小麥抗葉銹病近等基因系TcLr10和感病親本Thatche

2、r為材料，分別提取未接種和接種后的TcLr10和Thatcher的蛋白質(zhì)組。對(duì)提取方法以及電泳條件進(jìn)行了摸索，建立起了一套適合于小麥的蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)體系。用三氯乙酸/丙酮沉淀法提取小麥蛋白質(zhì)組，用丙酮沉淀四次，得到質(zhì)量較高的蛋白樣品。平衡過程采用兩步均為15min的平衡程序，可減輕第二向電泳中的蛋白質(zhì)點(diǎn)縱向拖尾現(xiàn)象。 通過對(duì)未接種和接種后的Tclr10與Thatcher的蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)了四個(gè)有差異的蛋白

3、點(diǎn)。對(duì)這四個(gè)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜分析，再進(jìn)行數(shù)據(jù)庫(kù)查詢，結(jié)果找到了與之具有同源性的蛋白質(zhì)，分析可能與抗病反應(yīng)有關(guān)。 (1)蛋白質(zhì)點(diǎn)a與H<'+>轉(zhuǎn)運(yùn)ATPase的亞基1具有同源性，該酶位于質(zhì)膜上，可能在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮作用。質(zhì)膜H<'+>-ATPase的主要作用是產(chǎn)生細(xì)胞膜兩側(cè)H<'+>的電化學(xué)梯度。 (2)蛋白質(zhì)點(diǎn)b與RuBisCO大亞基結(jié)合蛋白具有同源性，是葉綠體分子陪伴蛋白，該蛋白是一種分子伴侶?？赡茉谛←溑c葉銹菌互作過程中起