太谷核不育小麥Ms2近等基因系的差異蛋白組學(xué)研究.pdf

1、為了獲得Ms2調(diào)控雄性不育的相關(guān)蛋白，從蛋白組學(xué)方面闡明Ms2雄性不育的形成機(jī)理，本實驗以‘魯麥15’為背景材料的太谷核不育小麥Ms2近等基因系:魯麥15，Ms2魯麥15和Rht10+ Ms2魯麥15為材料，根據(jù)鏡檢和形態(tài)確定幼穗發(fā)育時期，在減數(shù)分裂期、單核期和二核期取幼穗，提取幼穗全蛋白，雙向電泳分離，掃描后獲得蛋白表達(dá)圖譜，分析獲得的可育系（“魯麥15”）和不育系（“Ms2魯麥15”和“Rht10+ Ms2魯麥15”）在三個時期的差

2、異蛋白點;通過MOLDI-TOF進(jìn)行蛋白點質(zhì)譜鑒定，質(zhì)譜結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)庫搜索分析，明確差異蛋白點類型。獲得結(jié)果如下:
　　1、不育系蛋白點數(shù)少于可育系。2-DE圖譜結(jié)果表明，魯麥15的表達(dá)蛋白最多，在減數(shù)時期、單核時期和二核時期時期得到的蛋白點均為900多個;Ms2魯麥15各個時期的蛋白點均少于魯麥15，其中單核期最多，為890個左右，其次是減數(shù)時期有860個左右，二核期的蛋白點最少為820個左右，這些蛋白點大多分布在pH4.5-6

3、.5，分子量20-90KD之間。
　　2、三個幼穗發(fā)育期，可育系和不育系之間具有明顯不同的差異蛋白數(shù)目和差異蛋白點，二核期得到的差異點最多。在減數(shù)時期差異蛋白點有27個，其中魯麥15有14個，不育系有13個;單核時期差異蛋白點有39個，魯麥15有24個，不育系有15個;二核時期得到差異點為53個，魯麥15有28個，不育系有25個。除蛋白點DX1在魯麥15單核時期和二核時期都出現(xiàn)外，各個時期差異蛋白點不同。
　　3、對得到11

4、9個蛋白差異點以進(jìn)行質(zhì)譜鑒定和數(shù)據(jù)庫比對分析，80％的蛋白點得到了鑒定且可信度較高，對這些鑒定的蛋白進(jìn)行功能分類，主要可以分為以下幾類:蛋白質(zhì)合成相關(guān)蛋白，花粉合成相關(guān)蛋白，物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白，能量代謝相關(guān)蛋白，細(xì)胞程序性死亡相關(guān)蛋白，熱激蛋白以及一些功能未知的預(yù)測蛋白。
　　4、花粉敗育是由于在花粉發(fā)育過程中缺少某些特定的蛋白或者酶引起的。對這些鑒定后的蛋白進(jìn)行功能分析，轉(zhuǎn)錄翻譯相關(guān)蛋白的缺失，細(xì)胞程序性死亡，能量代謝紊