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1、因臭氧層破壞導(dǎo)致的紫外線(UV)-B輻射增強,是目前倍受關(guān)注的環(huán)境問題之一。眾多研究表明,Uv-B輻射增強會導(dǎo)致植物形態(tài)和遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)變異、光合色素破壞、光合作用強度和能力下降,從而間接影響人類生活與生存。UV-B輻射增強對水稻農(nóng)作物的影響及保護機制便成為近年來國際上研究的熱點。本研究以不同抗性品種水稻Lemont和Dular為材料,利用雙向電泳、質(zhì)譜技術(shù)并結(jié)合生物信息學(xué)的方法對UV-B脅迫下的水稻進行了差異蛋白的比較分析,以探討水稻抗
2、UV-B輻射的分子機制。實驗在UV-B輻射處理1天、7天和14天的時候,分別提取對照與處理水稻幼苗葉片總蛋白,通過雙向電泳和圖譜分析發(fā)現(xiàn)有39個蛋白質(zhì)產(chǎn)生差異表達。對其中差異明顯、表達豐度高的30個蛋白點進行MALDI-TOF/MS分析和數(shù)據(jù)庫檢索,共鑒定出23個差異蛋白質(zhì)點。這些蛋白質(zhì)從不同角度反映了UV-B輻射對水稻的影響以及水稻對UV-B的響應(yīng)。 根據(jù)實驗結(jié)果,UV-B輻射對水稻的傷害影響主要有以下幾個方面:(1) 光合作
3、用相關(guān)酶降解,導(dǎo)致光合強度下降;(2) 糖類的氧化分解受到阻礙,使細胞得不到充足的能量:(3)UV-B輻射下,蛋白質(zhì)分解加強。 水稻的抗UV-B響應(yīng)表現(xiàn)在:(1) 在糖類代謝上,多糖(蔗糖等)的合成作用加強,植物抗逆性提高;核糖5磷酸異構(gòu)酶的上調(diào)使糖類朝著有利于DNA修復(fù)的方向進行;(2) 不飽和脂肪酸的合成有利于減少由于膜脂過氧化作用導(dǎo)致的細胞膜結(jié)構(gòu)組成的變化;(3) 誘導(dǎo)葉綠體蛋白的合成、蛋白質(zhì)折疊加工作用增強;(4) 信號
4、轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)酶活性增強:(5)細胞防御體系的響應(yīng)包括活性氧清除和次生代謝物質(zhì)的合成作用加強。 根據(jù)細胞定位的結(jié)果,這些蛋白質(zhì)主要位于葉綠體、線粒體和細胞質(zhì)中。其中47.8%定位在葉綠體中,占大多數(shù)。這將為進一步從亞細胞水平上研究水稻抗UV-B輻射的分子機制奠定基礎(chǔ)。 實驗發(fā)現(xiàn),抗UV-B輻射水稻品種Lemont在蛋白水平的差異更大,所鑒定的23個蛋白均有豐度變化,可見其抗性調(diào)節(jié)的范圍更廣。而UV-B敏感型水稻Dular只
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